3)冷冻蚀刻技术。在快速冷冻下对生物样品进行断裂、蚀刻和复型,制备生物样品复 型膜的技术称冷冻蚀刻技术。在电镜下观察复型膜可获得立体感强的超微结构图像,主要用 于生物膜结构的研究。 4)电镜细胞化学技术。在超微结构水平上,通过电镜细胞化学反应来研究细胞成分的 分布和变化的方法称电镜细胞化学技术。这一技术把细胞超微结构与其化学组成有机地结合 起来,目前主要用于研究细胞内各种大分子物质和酶的定位等。 5)兔疫电镜技术。这是一种使抗原在超微结构水平上定位的技术,应用与抗原相应的 标记抗体,在电镜下观察标记物的位置,从而定位相应抗原。这一技术具有灵敏度高、特异 性强的特点 6)电镜放射自显影技术。这是电镜技术与放射自显影技术相结合,观察放射性物质在 超微结构水平上的定位和变化,从而了解细胞的各种代谢活动。这一技术使结构与功能的研 究结合起来,是一种动态的研究方法 2.与SEM有关的电子显微术 )SEM常规制样技术。SEM适合于研究生物样品的表面特征,样品制备包括样品观察 面的暴露、固定、干燥和导电等步骤,使表面特征充分暴露而不变形。这一技术是SEM样 品制备的常规技术,主要用于组织、细胞、寄生虫等表面形貌的研究。 2)生物标本割裂技术。将生物标本放在特殊包埋剂中经冷冻或其他方法固化,然后把 固化的标本割裂,暴露组织和细胞的内部结构,再经干燥和导电后在SEM下观察。这一技 术使SEM能观察生物标本的内部结构,目前最常用的是冷冻割裂技术 3)铸型技术。用铸型技术(如甲基丙烯酸酯和ABS等)注入生物体的腔性器官,制成 铸型标本,可在SEM下观察管腔内表面的结构。目前最常用的是血管铸型技术,用以研究 微小血管的分布和形貌。 6.3.2电子显微术在中医药临床及动物实验研究中的应用 在生命科学领域中,电镜技术已渗入到各个学科,且应用日益广泛。电镜技术是现代科 学技术的一个组成部分,是形态学科不可缺少的工具,她已成为中医药临床及实验研究中的 一个新的武器。现就近十多年来电镜技术在中医药临床及实验研究中的应用现状摘要综述如 6.3.2.1在中医病因病机研究方面的应用 电镜技术有力地推动了中医病因病机的研究和进展,为中医学的发展作出了卓越的贡 献。如在中医舌诊方面:陈泽霖、戴豪良等进行了各种正常健康人以及非健康人舌苔的电镜 研究。 在中医六淫病因方面,张六通等根据祖国医学理论,选择符合中医六淫病因学说的造模 因素,模拟自然潮湿环境,将动物分为外湿组、湿热组、寒湿组、寒冷组、湿热组和正常对 照组。于造模第12天、40天、108天时进行大鼠关节、肺、大小肠、肝等病理学研究。结果 发现均存在不同程度的病理形态学和超微结构的改变。随着造模时间的延长逐渐加重。提示 外湿致病确有其病理学基础。 韩国栋建立了“肺与大肠相表里”的实验动物模型,发现在人工致直肠狭窄后模型鼠有 反应性脏腑损害,尤其是超微结构有改变,大承气汤对上述肺损害有明显修复作用。指出肺 充血、水肿、出血以及肺泡壁Ⅰ、Ⅱ型上皮细胞的肿胀变性等是构成肺失肃降的病理学基础 6.3.2.2在中医证型研究方面的应用 在脾气虚证方面,傅湘琪、谢仰洲等运用过劳或劳倦和饮食失节法或者中医耗气破气法 制造了驴及大鼠的脾气虚证模型,并结合电镜技术进行肝脏线粒体、胃肠粘膜、血小板等多 方面的超微结构观察:刘健等还动态观察了其心肌细胞超微结构,结果提示脾气虚证大鼠心 肌细胞线粒体的变化是一个由轻到重的渐进过程,与空肠线粒体的病变程度密切相关,随营 养物质吸收障碍加重而渐趋加重,是脾虚证心功能逐渐降低的形态学基础和形成机理 许长照对脾虚证的十二指肠作了病理组织学及超微结构研究:周福生观察了脾虚证的十 二指肠球部溃疡之肥大细胞变化;刘友章用扫描电镜观察了脾胃气虚与肝胃不和型胃脘痛患 者胃粘膜的不同特点;张桂珍观察了脾虚患者胃粘膜组织中胆碱能神经终末超微结构的变 化:裴媛观察了脾阳虚大鼠横纹肌线粒体的超微结构:劳绍贤硏究了脾虚证胃肠粘膜线粒体 的变化:李湛民观察了脾阳虚小鼠胃肠组织细胞超微结构改变。3）冷冻蚀刻技术。在快速冷冻下对生物样品进行断裂、蚀刻和复型，制备生物样品复 型膜的技术称冷冻蚀刻技术。在电镜下观察复型膜可获得立体感强的超微结构图像，主要用 于生物膜结构的研究。 4）电镜细胞化学技术。在超微结构水平上，通过电镜细胞化学反应来研究细胞成分的 分布和变化的方法称电镜细胞化学技术。这一技术把细胞超微结构与其化学组成有机地结合 起来，目前主要用于研究细胞内各种大分子物质和酶的定位等。 5）免疫电镜技术。这是一种使抗原在超微结构水平上定位的技术，应用与抗原相应的 标记抗体，在电镜下观察标记物的位置，从而定位相应抗原。这一技术具有灵敏度高、特异 性强的特点。 6）电镜放射自显影技术。这是电镜技术与放射自显影技术相结合，观察放射性物质在 超微结构水平上的定位和变化，从而了解细胞的各种代谢活动。这一技术使结构与功能的研 究结合起来，是一种动态的研究方法。 2．与SEM有关的电子显微术 1）SEM常规制样技术。SEM适合于研究生物样品的表面特征，样品制备包括样品观察 面的暴露、固定、干燥和导电等步骤，使表面特征充分暴露而不变形。这一技术是 SEM样 品制备的常规技术，主要用于组织、细胞、寄生虫等表面形貌的研究。 2）生物标本割裂技术。将生物标本放在特殊包埋剂中经冷冻或其他方法固化，然后把 固化的标本割裂，暴露组织和细胞的内部结构，再经干燥和导电后在 SEM下观察。这一技 术使 SEM能观察生物标本的内部结构，目前最常用的是冷冻割裂技术。 3）铸型技术。用铸型技术（如甲基丙烯酸酯和ABS等）注入生物体的腔性器官，制成 铸型标本，可在 SEM下观察管腔内表面的结构。目前最常用的是血管铸型技术，用以研究 微小血管的分布和形貌。 6．3．2 电子显微术在中医药临床及动物实验研究中的应用 在生命科学领域中，电镜技术已渗入到各个学科，且应用日益广泛。电镜技术是现代科 学技术的一个组成部分，是形态学科不可缺少的工具，她已成为中医药临床及实验研究中的 一个新的武器。现就近十多年来电镜技术在中医药临床及实验研究中的应用现状摘要综述如 下。 6．3．2．1 在中医病因病机研究方面的应用 电镜技术有力地推动了中医病因病机的研究和进展，为中医学的发展作出了卓越的贡 献。如在中医舌诊方面：陈泽霖、戴豪良等进行了各种正常健康人以及非健康人舌苔的电镜 研究。 在中医六淫病因方面，张六通等根据祖国医学理论，选择符合中医六淫病因学说的造模 因素，模拟自然潮湿环境，将动物分为外湿组、湿热组、寒湿组、寒冷组、湿热组和正常对 照组。于造模第12天、40天、108天时进行大鼠关节、肺、大小肠、肝等病理学研究。结果 发现均存在不同程度的病理形态学和超微结构的改变。随着造模时间的延长逐渐加重。提示 外湿致病确有其病理学基础。 韩国栋建立了“肺与大肠相表里”的实验动物模型，发现在人工致直肠狭窄后模型鼠有 反应性脏腑损害，尤其是超微结构有改变，大承气汤对上述肺损害有明显修复作用。指出肺 充血、水肿、出血以及肺泡壁Ⅰ、Ⅱ型上皮细胞的肿胀变性等是构成肺失肃降的病理学基础 之一。 6．3．2．2 在中医证型研究方面的应用 在脾气虚证方面，傅湘琪、谢仰洲等运用过劳或劳倦和饮食失节法或者中医耗气破气法 制造了驴及大鼠的脾气虚证模型，并结合电镜技术进行肝脏线粒体、胃肠粘膜、血小板等多 方面的超微结构观察；刘健等还动态观察了其心肌细胞超微结构，结果提示脾气虚证大鼠心 肌细胞线粒体的变化是一个由轻到重的渐进过程，与空肠线粒体的病变程度密切相关，随营 养物质吸收障碍加重而渐趋加重，是脾虚证心功能逐渐降低的形态学基础和形成机理。 许长照对脾虚证的十二指肠作了病理组织学及超微结构研究；周福生观察了脾虚证的十 二指肠球部溃疡之肥大细胞变化；刘友章用扫描电镜观察了脾胃气虚与肝胃不和型胃脘痛患 者胃粘膜的不同特点；张桂珍观察了脾虚患者胃粘膜组织中胆碱能神经终末超微结构的变 化；裴媛观察了脾阳虚大鼠横纹肌线粒体的超微结构；劳绍贤研究了脾虚证胃肠粘膜线粒体 的变化；李湛民观察了脾阳虚小鼠胃肠组织细胞超微结构改变