● 加热使DNA变性是实验室最常用的方法，称为热变性，DNA热 变性发生在一个狭窄的温度范围内。通常将DNA变性达到50%时 (即增色效应达到一半时)的温度称为解链温度或熔解温度 (melting temperature】,用Tm表示。 退火(annealing):热变性DNA在缓慢冷却时，可以复性，这 种复性称为退火。 "淬火”(quench):将热变性的DNA骤然冷却时，DNA不 可能复性，这是由于温度突然降低，单链DNA分子失去碰撞的机 会，因而不能复性，仍然保持单链变性的状态。将热变性DNA骤 然冷却的处理过程叫“淬火”。 利用“淬火”的原理，在用同位素标记的双链DNA片段进行分子 杂交时，为获得单链的杂交探针，可将装有热变性DNA溶液的试 管直接插入冰浴，使溶液在冰浴中骤然冷却至0°℃ 66 ⚫ 加热使DNA变性是实验室最常用的方法，称为热变性，DNA热 变性发生在一个狭窄的温度范围内。通常将DNA变性达到50%时 （即增色效应达到一半时）的温度称为解链温度或熔解温度 （melting temperature），用Tm表示。 ⚫ 退火（annealing）：热变性DNA 在缓慢冷却时，可以复性，这 种复性称为退火。 ⚫ “淬火”（quench）：将热变性的DNA 骤然冷却时，DNA不 可能复性，这是由于温度突然降低，单链DNA 分子失去碰撞的机 会，因而不能复性，仍然保持单链变性的状态。将热变性DNA骤 然冷却的处理过程叫“淬火” 。 ⚫ 利用“淬火”的原理，在用同位素标记的双链DNA片段进行分子 杂交时，为获得单链的杂交探针，可将装有热变性DNA 溶液的试 管直接插入冰浴，使溶液在冰浴中骤然冷却至0℃