生物 第四节蛋白质的理化性质 化学 及其分膏轮化 理化性质 2 分离纯化 蛋白质沈淀 原则 等电点沉淀 方法 不同的蛋白质有不同的等电点，蛋白质在 利用差异 等电点处，净电荷为零，溶解度最低。所以 沉淀 通过改变溶液的pH值，可以使不同等电点 电泳 的蛋白质分别沉淀出来。 层粉 在蛋白质盐析、有机溶剂沉淀时，通常将 溶液的pH调到期等电点处。 膜分离 3 分析鉴定 生物 化学 第四节 蛋白质的理化性质 及其分离纯化 蛋白质沉淀 盐溶与盐析 盐溶：在较低的盐浓度下蛋白质溶解度增 大的现象，称为盐溶。 盐析：在蛋白质溶液中加入大量中性盐， 以破坏蛋白质表面的双电层，使蛋白质从溶 液中沉淀析出，称为盐析。 在分离蛋白质时通常利用盐溶促进蛋白 质转移到溶液中，然后利用盐析使蛋白质从 溶液中沉淀出来。 常用的中性盐有：硫酸铵、氯化钠、硫 酸钠等。 分离纯化 分析鉴定 理化性质 原则 方法 利用差异 沉淀 电泳 层析 离心 膜分离 蛋白质沉淀 有机溶剂沉淀 与水以任意比例混合的有机溶剂，如乙醇、 甲醇、丙酮等，可使蛋白质沉淀。 沉淀原理是：① 脱水作用；② 使水的介电 常数降低，蛋白质溶解度降低。 有机溶剂分级沉淀：不同的蛋白质对于不 同浓度不同比例有机溶剂的敏感度不同，所 以通过改变有机溶剂的比例和浓度可以将不 同的蛋白质分别沉淀出来。 有机溶剂沉淀蛋白质时在低温下进行。 蛋白质沉淀 等电点沉淀 不同的蛋白质有不同的等电点，蛋白质在 等电点处，净电荷为零， 溶解度最低。所以 通过改变溶液的pH值，可以使不同等电点 的蛋白质分别沉淀出来。 在蛋白质盐析、有机溶剂沉淀时，通常将 溶液的pH调到期等电点处。 (1) (2) 1 ④ ⑤ ⑥ ① ② ③