改变生活的生物技术杂交瘤技术制备单克隆抗体卢文涵临床医学(八年制)16301050263 杂交瘤技术制备单克隆抗体 卢文涵16301050263 众所周知,动物体通过免疫系统来抵抗外来病原体的侵袭,清除体内衰老细 胞并监控体内突变细胞。免疫过程中最重要的便是特异性免疫应答,其分为两大 类一一细胞免疫应答(即细胞免疫)和抗体免疫应答(体液免疫)。而抗体是体 液免疫中最为关键的、能够与抗原特异性结合,经过一系列过程使抗原失效的 种免疫球蛋白。动物体内的B淋巴细胞被抗原物质以及活化辅助性T细胞分泌的 白细胞介素-2致敏,并克隆分化为效应B细胞和记忆B细胞,其中效应B细胞 能够分泌抗体参与免疫应答。 目前临床和基础研究方面,抗原-抗体反应可用于诊断和防治各种疾病,并 可研究抗原物质在细胞中的定位及其功能等。传统的通过注射减毒灭活抗原致使 机体(如某些实验动物)产生抗体从而制备抗体的技术不能满足抗原抗体反应的 髙度特异性以及大量实验的需要一一这些实验要求制备抗体的浓度极高,且需保 证具有足够的抗体。而我在接下来的内容中将要介绍的技术一一杂交瘤技术,便 是一种能够很好地解决该问题的一种生物技术。它是免疫技术发展过程中的一块 里程碑。 杂交瘤技术原理 想要制备高纯度大量抗体,研究人员面临着两个重要难题。首先,他们可以 利用抗原刺激B淋巴细胞产生特异性抗体,但却无法对这些B淋巴细胞进行人工 培养,即无法从这些细胞中获取足量的抗体;而从多发性骨髓瘤中分离出的B 淋巴细胞虽能进行人工培养并传代,但却无法从其分泌的抗体中选择我们所需要 的抗体类型。杂交瘤技术便是利用细胞融合技术,使能够无限传代的骨髓瘤细胞 与能够产生抗体的B淋巴细胞结合,并进行筛选和克隆,从而得到来自单一细胞 的、既能无限传代、又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞克隆。其制备得到的抗体 即为单克隆抗体。 杂交瘤技术的基本过程如下:(见图一) 1、用外界抗原刺激动物(如小鼠),使之发生免疫反应,使B淋巴细胞产生 抗体 利用仙台病毒或聚乙二醇作介导,使经免疫的动物的脾细胞与能无限传 代的骨髓瘤细胞融合; 3、经过筛选、克隆培养,获得来自单一细胞的、既能产生单一性抗体,又 能无限增殖的杂交瘤细胞克隆。 在用外界抗原刺激动物时,选用的是特定的、能使B淋巴细胞产生免疫反应 并分泌目的抗体的抗原蛋白,其虽然不再对机体具有攻击性,但却保留了抗原物 质的MC,能够启动一系列免疫应答从而使B细胞成功分裂分化产生相应效应B 细胞。另外,由于骨髓瘤细胞具有无限传代的能力,我们能够成功在体外培养 定量骨髓瘤细胞。二者融合的过程,研究者们应用了仙台病毒或聚乙二醇作介导 那么这些物质诱导细胞融合的原理又是什么呢? 以仙台病毒为例,通过电镜照片证明,病毒颗粒会嵌入相邻细胞的细胞膜之 间或埋入许多细胞表面的微绒毛内。故有学者认为病毒颗粒,病毒颗粒本身可能 起着一种粘合剂的作用,并能使细胞膜产生一些断裂。目前广为接受的观点为,改变生活的生物技术 杂交瘤技术制备单克隆抗体 卢文涵 临床医学（八年制）16301050263 1 杂交瘤技术制备单克隆抗体 卢文涵 16301050263 众所周知，动物体通过免疫系统来抵抗外来病原体的侵袭，清除体内衰老细 胞并监控体内突变细胞。免疫过程中最重要的便是特异性免疫应答，其分为两大 类——细胞免疫应答（即细胞免疫）和抗体免疫应答（体液免疫）。而抗体是体 液免疫中最为关键的、能够与抗原特异性结合，经过一系列过程使抗原失效的一 种免疫球蛋白。动物体内的 B 淋巴细胞被抗原物质以及活化辅助性 T 细胞分泌的 白细胞介素-2 致敏，并克隆分化为效应 B 细胞和记忆 B 细胞，其中效应 B 细胞 能够分泌抗体参与免疫应答。 目前临床和基础研究方面，抗原-抗体反应可用于诊断和防治各种疾病，并 可研究抗原物质在细胞中的定位及其功能等。传统的通过注射减毒灭活抗原致使 机体（如某些实验动物）产生抗体从而制备抗体的技术不能满足抗原抗体反应的 高度特异性以及大量实验的需要——这些实验要求制备抗体的浓度极高，且需保 证具有足够的抗体。而我在接下来的内容中将要介绍的技术——杂交瘤技术，便 是一种能够很好地解决该问题的一种生物技术。它是免疫技术发展过程中的一块 里程碑。 杂交瘤技术原理 想要制备高纯度大量抗体，研究人员面临着两个重要难题。首先，他们可以 利用抗原刺激 B 淋巴细胞产生特异性抗体，但却无法对这些 B 淋巴细胞进行人工 培养，即无法从这些细胞中获取足量的抗体；而从多发性骨髓瘤中分离出的 B 淋巴细胞虽能进行人工培养并传代，但却无法从其分泌的抗体中选择我们所需要 的抗体类型。杂交瘤技术便是利用细胞融合技术，使能够无限传代的骨髓瘤细胞 与能够产生抗体的 B 淋巴细胞结合，并进行筛选和克隆，从而得到来自单一细胞 的、既能无限传代、又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞克隆。其制备得到的抗体 即为单克隆抗体。 杂交瘤技术的基本过程如下：（见图一） 1、用外界抗原刺激动物（如小鼠），使之发生免疫反应，使 B 淋巴细胞产生 抗体； 2、利用仙台病毒或聚乙二醇作介导，使经免疫的动物的脾细胞与能无限传 代的骨髓瘤细胞融合； 3、经过筛选、克隆培养，获得来自单一细胞的、既能产生单一性抗体，又 能无限增殖的杂交瘤细胞克隆。 在用外界抗原刺激动物时，选用的是特定的、能使 B 淋巴细胞产生免疫反应 并分泌目的抗体的抗原蛋白，其虽然不再对机体具有攻击性，但却保留了抗原物 质的 MHC，能够启动一系列免疫应答从而使 B 细胞成功分裂分化产生相应效应 B 细胞。另外，由于骨髓瘤细胞具有无限传代的能力，我们能够成功在体外培养一 定量骨髓瘤细胞。二者融合的过程，研究者们应用了仙台病毒或聚乙二醇作介导， 那么这些物质诱导细胞融合的原理又是什么呢？ 以仙台病毒为例，通过电镜照片证明，病毒颗粒会嵌入相邻细胞的细胞膜之 间或埋入许多细胞表面的微绒毛内。故有学者认为病毒颗粒，病毒颗粒本身可能 起着一种粘合剂的作用，并能使细胞膜产生一些断裂。i目前广为接受的观点为