华东理工大学 《酶工程》讲义 子催化效力的减少,不涉及酶分子合成的问题 二、抑制程度的表示 一般用反应速度的变化来表示。若以不加抑制剂时的反应速度为Vo,加入抑制剂后的 反应速度为V,则酶的抑制程度有下列几种表示方法: 1.相对活力分数(残余活力分数)a=Vi/Vo 2.相对活力百分数(残余活力百分数)a%=Vi/Vo*100% 3.抑制分数,指被抑制而失去活力的分数i=1-a=1-vi/Vo 4.抑制百分数i%=(1-a)*100%=(1-Vi/Vo)*100% 通常所谓抑制率是指抑制分数或抑制百分数。 抑制作用的分类 不可逆抑制作用(非专一性不可逆抑制作用:专一性不可逆抑制作用) 可逆抑制作用(竞争性抑制作用,非竞争性抑制作用,反竞争性抑制作用,混合型抑制) 四、抑制作用的定义 1.不可逆抑制作用 抑制剂与酶的必需基团以共价键结合而引起酶活性丧失,不能用透析,超滤或凝胶过滤 等物理方法去除抑制剂而使酶复活者,称为不可逆抑制作用。由于被抑制的酶分子受到不同 程度的修饰,故不可逆抑制也就是酶的修饰抑制 2.可逆抑制作用 抑制剂与酶以非共价键结合而引起酶活性的降低或丧失,能用物理的方法除去抑制剂而 使酶复活者称为可逆抑制作用。这种抑制剂又可通过两种不同的方式与酶结合而抑制酶的活 性 (1)抑制剂与酶的活性中心相结合,阻断酶分子的结合基团或催化基团,或与酶一底物中 间复合体结合,从而阻止底物形成产物。这类抑制剂在酶分子上的结合部位基本上和底物相 同或相近,故称为同位抑制剂,这种抑制作用也就叫做同位抑制作用。 (2)抑制剂和酶分子活性中心以外的部位相结合,通过酶分子空间构象的改变,从而影 响底物与酶的结合与酶的结合或酶的催化效率。由于抑制剂与酶的结合部位不同于底物的结 合部位,故这种抑制剂称为别位抑制剂。为了表示其可引起酶的变构,也可译作别构抑制剂 这类抑制作用也就叫作别构抑制作用。可引起别构作用的酶称位别构酶,别构酶大多是有 个亚基的寡聚体酶,将在下章予以详细介绍。而本章主要介绍同位抑制作用 五、可逆抑制和不可逆抑制作用的鉴别 除了根据上述透析,过滤等物理方法视其能否去除抑制剂来区别不可逆抑制和可逆抑制 作用外,还可以利用下列两种动力学方法来加鉴别 1.将不同量的酶加入含有等量底物和抑制剂的试管中,使各管的体积相等,测定酶促 反应的初速度,并用酶浓度[E对初速度V作图。当反应系统中不加抑制剂时,可得到一条 通过零点得直线(直线a)。当反应系统中有一定量的不可 逆抑制剂时,后者可抑制一定量的酶,只有当加入酶的摩尔 数超过抑制剂的摩尔数,即尚有剩余的酶分子时,才能表现 活力。而一旦具有活力后,其反应的初速度随酶量的增高程 度应和无抑制剂时一样,故[E]对V作图时得到一条原点向 右移而与直线a平行的直线b。当反应系统中含有一定量的 可逆性抑制剂时,因抑制剂的量是恒定的,对酶的抑制分数 也是恒定的,因此可得一通过零点但斜率较低的直线C。 2.一定量的抑制剂先与一定量的酶保温一定时间后 取出不同量的混合液加至等量的底物中,各管的体积也保持 围s-2不可抛制与可进律制的鉴 无制b,有不可制阳有可制华东理工大学 《酶工程》讲义 8 子催化效力的减少，不涉及酶分子合成的问题。 二、抑制程度的表示 一般用反应速度的变化来表示。若以不加抑制剂时的反应速度为 Vo，加入抑制剂后的 反应速度为 Vi，则酶的抑制程度有下列几种表示方法： ⒈ 相对活力分数（残余活力分数）a=Vi/Vo ⒉ 相对活力百分数（残余活力百分数） a%==Vi/Vo*100% ⒊ 抑制分数，指被抑制而失去活力的分数 i=1-a=1-Vi/Vo ⒋ 抑制百分数 i%=(1-a)*100%==(1-Vi/Vo)*100% 通常所谓抑制率是指抑制分数或抑制百分数。 三、抑制作用的分类 不可逆抑制作用（非专一性不可逆抑制作用；专一性不可逆抑制作用） 可逆抑制作用（竞争性抑制作用，非竞争性抑制作用，反竞争性抑制作用，混合型抑制） 四、抑制作用的定义 ⒈ 不可逆抑制作用 抑制剂与酶的必需基团以共价键结合而引起酶活性丧失，不能用透析，超滤或凝胶过滤 等物理方法去除抑制剂而使酶复活者，称为不可逆抑制作用。由于被抑制的酶分子受到不同 程度的修饰，故不可逆抑制也就是酶的修饰抑制。 ⒉ 可逆抑制作用： 抑制剂与酶以非共价键结合而引起酶活性的降低或丧失，能用物理的方法除去抑制剂而 使酶复活者称为可逆抑制作用。这种抑制剂又可通过两种不同的方式与酶结合而抑制酶的活 性。 ⑴ 抑制剂与酶的活性中心相结合，阻断酶分子的结合基团或催化基团，或与酶-底物中 间复合体结合，从而阻止底物形成产物。这类抑制剂在酶分子上的结合部位基本上和底物相 同或相近，故称为同位抑制剂，这种抑制作用也就叫做同位抑制作用。 ⑵ 抑制剂和酶分子活性中心以外的部位相结合，通过酶分子空间构象的改变，从而影 响底物与酶的结合与酶的结合或酶的催化效率。由于抑制剂与酶的结合部位不同于底物的结 合部位，故这种抑制剂称为别位抑制剂。为了表示其可引起酶的变构，也可译作别构抑制剂。 这类抑制作用也就叫作别构抑制作用。可引起别构作用的酶称位别构酶，别构酶大多是有一 个亚基的寡聚体酶，将在下章予以详细介绍。而本章主要介绍同位抑制作用。 五、可逆抑制和不可逆抑制作用的鉴别 除了根据上述透析，过滤等物理方法视其能否去除抑制剂来区别不可逆抑制和可逆抑制 作用外，还可以利用下列两种动力学方法来加鉴别。 ⒈ 将不同量的酶加入含有等量底物和抑制剂的试管中，使各管的体积相等，测定酶促 反应的初速度，并用酶浓度[E]对初速度 V 作图。当反应系统中不加抑制剂时，可得到一条 通过零点得直线（直线 a）。当反应系统中有一定量的不可 逆抑制剂时，后者可抑制一定量的酶，只有当加入酶的摩尔 数超过抑制剂的摩尔数，即尚有剩余的酶分子时，才能表现 活力。而一旦具有活力后，其反应的初速度随酶量的增高程 度应和无抑制剂时一样，故[E]对 V 作图时得到一条原点向 右移而与直线 a 平行的直线 b。当反应系统中含有一定量的 可逆性抑制剂时，因抑制剂的量是恒定的，对酶的抑制分数 也是恒定的，因此可得一通过零点但斜率较低的直线 C。 ⒉ 一定量的抑制剂先与一定量的酶保温一定时间后， 取出不同量的混合液加至等量的底物中，各管的体积也保持