图04-3吸光光度法工作曲线 朗伯比耳定律的局限性 朗伯-比耳定律是一个有限制性的定律,它假设了吸收粒子之间是无相互作 用的,因此仅在稀溶液的情况下才适用。在高浓度(通常c>0.01moLl)时,由 于吸光物质的分子或离子间的平均距离缩小,使相邻的吸光微粒(分子或离子) 的电荷分布互相影响,从而改变了它对光的吸收能力。由于这种相互影响的过程 同浓度有关系,因此使吸光度A与浓度c之间的线性关系发生了偏离。 二、非单色入射光引起的偏离 严格地讲,朗伯-比耳定律仅在入射光为单色光时才是正确的,实际上一般 分光光度计中的单色器获得的光束不是严格的单色光,而是具有较窄波长范围的 复合光带,这些非单色光会引起对朗伯-比耳定律的偏离,而不是定律本身的不 正确,这是由仪器条件的限制所造成的。 三、由于溶液本身发生化学变化的原因而引起的偏离 由于被测物质在溶液中发生缔合、解离或溶剂化、互变异构、配合物的逐 级形成等化学原因,造成对朗伯-比耳定律的偏离。这类原因所造成的误差称为 化学误差。例如,在一个非缓冲体系的铬酸盐溶液中存在着如下的平衡: Cr207-+H2O F 2HCrO4 2Cr042-+2H+ (橙色) (黄色) 测定时,在大部分波长处,Cr2O2的k值与CrO2的k值是很不相同的。因 此,当铬的总浓度相同时,各溶液的吸光度决定于c(Cr2Or2CrO42)之比值,它 将随溶液的稀释而发生显著的变化。所以将造成A与c之间线性关系的明显偏 离。为了控制这一偏离可采用:在溶液中加碱使其中Cr2O2全部转化为CrO42-; 或加酸,使CrO2全部转化为CmO-2。这样溶液中的总浓度c与A之间就能符 合朗伯-比耳定律。 另外,有些配合物的稳定性较差,由于溶液稀释导致配合物离解度増大,使图 04-3 吸光光度法工作曲线 一、朗伯-比耳定律的局限性 朗伯-比耳定律是一个有限制性的定律，它假设了吸收粒子之间是无相互作 用的，因此仅在稀溶液的情况下才适用。在高浓度（通常 c0.01molL -1）时，由 于吸光物质的分子或离子间的平均距离缩小，使相邻的吸光微粒（分子或离子） 的电荷分布互相影响，从而改变了它对光的吸收能力。由于这种相互影响的过程 同浓度有关系，因此使吸光度 A 与浓度 c 之间的线性关系发生了偏离。 二、非单色入射光引起的偏离 严格地讲，朗伯-比耳定律仅在入射光为单色光时才是正确的，实际上一般 分光光度计中的单色器获得的光束不是严格的单色光，而是具有较窄波长范围的 复合光带，这些非单色光会引起对朗伯-比耳定律的偏离，而不是定律本身的不 正确，这是由仪器条件的限制所造成的。 三、由于溶液本身发生化学变化的原因而引起的偏离 由于被测物质在溶液中发生缔合、解离或溶剂化、互变异构、配合物的逐 级形成等化学原因，造成对朗伯-比耳定律的偏离。这类原因所造成的误差称为 化学误差。例如，在一个非缓冲体系的铬酸盐溶液中存在着如下的平衡： Cr2O7 2- + H2O 2HCrO4 - 2CrO4 2- + 2H+ (橙色) (黄色) 测定时，在大部分波长处，Cr2O7 2-的值与 CrO4 2-的值是很不相同的。因 此，当铬的总浓度相同时，各溶液的吸光度决定于 c(Cr2O7 2- /CrO4 2- )之比值，它 将随溶液的稀释而发生显著的变化。所以将造成 A 与 c 之间线性关系的明显偏 离。为了控制这一偏离可采用：在溶液中加碱使其中 Cr2O7 2-全部转化为 CrO4 2-； 或加酸，使 CrO4 2-全部转化为 Cr2O7 2-。这样溶液中的总浓度 c 与 A 之间就能符 合朗伯-比耳定律。 另外，有些配合物的稳定性较差，由于溶液稀释导致配合物离解度增大，使