14如果已知一小段DNA的序列，可采用PCR的方法简捷地分析出已知序列两侧的序列， 具体流程如（以EcoR I酶切为例 之染色体知NA 10切R学调 一之之混合的DNA片段 Ⅱ连接DNA连接酶 已知序列 物 )环状DNA Ⅱ扩增|Tag DNA聚合酶 一PCR产物 N测序、分析 3克鸭 请据图回答问题 （1)步骤 I用的EcoR I是一种 酶，它通过识别特定的 切割特定位点 (2)步骤Ⅱ用的DNA连接酶催化相邻核苷酸之间的3”羟基与5？磷酸间形 成 PCR循环中，升温到95℃是为了获得_ _:Taq DNA聚合酶的作用是催 化 (3)若如表所列为已知的DNA序列和设计的一些PCR引物，步骤选用的PCR引物必须 (从引物①②③④中选择，填编号)。 DNA序列虚线处省略了部分核首酸序列 000000 列 TSAACTATGCGCTCATGA-3 25-GCAATGCGTAGCCTCT-3 35-AGAGGCTACGCATTGC-3 45-TCATGAGCGCATAGTT-3 (4)对PCR产物测序，经分析得到了片段F的完整序列。下列DNA单链序列中虚线处省 略了部分核苷酸序列，结果正确的是 A 5-AACTATGCGAGCCCTT-3 B.5-AATICCATG-CTGAATT-3 C.5-GCAATGCGT-TCGGGAA-314.如果已知一小段 DNA 的序列,可采用 PCR 的方法,简捷地分析出已知序列两侧的序列, 具体流程如图(以 EcoRⅠ酶切为例): 请据图回答问题: (1)步骤Ⅰ用的 EcoRⅠ是一种 酶,它通过识别特定的 切割特定位点。 (2)步骤Ⅱ用的 DNA 连接酶催化相邻核苷酸之间的 3'-羟基与 5'-磷酸间形 成 ;PCR 循环中,升温到 95 ℃是为了获得 ;Taq DNA 聚合酶的作用是催 化 。 (3)若如表所列为已知的 DNA 序列和设计的一些 PCR 引物,步骤Ⅲ选用的 PCR 引物必须 是 (从引物①②③④中选择,填编号)。 项 目 DNA 序列(虚线处省略了部分核苷酸序列) 已 知 序 列 PCR 引 物 ①5'-AACTATGCGCTCATGA-3' ②5'-GCAATGCGTAGCCTCT-3' ③5'-AGAGGCTACGCATTGC-3' ④5'-TCATGAGCGCATAGTT-3' (4)对 PCR 产物测序,经分析得到了片段 F 的完整序列。下列 DNA 单链序列中(虚线处省 略了部分核苷酸序列),结果正确的是 。 A.5'-AACTATGCG┄AGCCCTT-3' B.5'-AATTCCATG┄CTGAATT-3' C.5'-GCAATGCGT┄TCGGGAA-3