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提取分离法 步骤及注意事项 选材:低温保存或立即开始。 破碎:制成组织匀浆。 提取:在一定的条件下,用适当的溶剂处理含酶原料,使酶充分 溶解到溶剂中的过程。(提取液体积为原料体积的35倍)。 提取方法:水、盐、酸、碱、有机溶剂。 ”分离纯化:采用各种生化分离技术,如离心、过滤、萃取、沉淀、 层析、电泳、浓缩、结晶、干燥等,使酶与各种质分离,达到 所需的纯度。 方法的选择:根据酶分子物理化学性质;与杂质的差异;使用 目的;技术难易;成本;污染等 ~保存:冰冻干燥成酶粉,低温;将酶的浓溶液制成含25%甘油低 温。-20℃ 判断一个纯化酶的方法优劣主要依据:酶的比活力和总活力 19 提取分离法 步骤及注意事项 ❖选材:低温保存或立即开始。 ❖破碎:制成组织匀浆。 ❖提取 :在一定的条件下,用适当的溶剂处理含酶原料,使酶充分 溶解到溶剂中的过程。(提取液体积为原料体积的3~5倍)。 提取方法:水、盐、酸、碱、有机溶剂。 ❖分离纯化:采用各种生化分离技术,如离心、过滤、萃取、沉淀、 层析、电泳、浓缩、结晶、干燥等,使酶与各种质分离,达到 所需的纯度。 方法的选择:根据酶分子物理化学性质;与杂质的差异;使用 目的;技术难易;成本;污染等 ❖保存:冰冻干燥成酶粉,低温;将酶的浓溶液制成含25%甘油低 温。-20℃ 判断一个纯化酶的方法优劣主要依据:酶的比活力和总活力
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