③温度对沉淀线的影响:在一定范围内,温度扩散快。通常反应在 0-37℃下进行。在双向扩散时,为了减少沉淀线变形并保持其清晰度,可 在37℃下形成沉淀线,然后置于室温或冰箱(4℃)中为佳。 ④琼脂浓度对沉淀线形成速度的影响:一般来说,琼脂浓度越大,沉 淀线出现越慢。 ⑤参加扩散的抗原与抗体间的距离对沉淀线形成的影响:抗原、抗体 相距越远,沉淀线形成的越慢,所以在微量玻片法时,孔间距离以 0.25-0.5cm为好,距离远影响反应速度。当然孔距过远,沉淀线的密度过 大,容易发生融合,有碍对沉淀线数目的确定。 ⑥时间对沉淀线的影响:沉淀线形成一般在1-3天出现,14-21天出现 的数目最多。玻片法可在1-2小时出现,一般观察72小时,放量过久可出 现沉淀线重合消失 (三)对流免疫电泳试验 对流免疫电泳是在琼脂扩散基础上结合电泳技术而建立的一种简便而 快速的方法。此方法能在短时间内出现结果,故可用于快速诊断,敏感性 比双向扩散技术高10-15倍。 血清蛋白在PH86条件下带负电荷,所以在电场作用下都向E极移动 但由于抗体分子在这样的PH条件下只带微弱的负电荷,而且它的分子量 又较大(为r球蛋白)。所以游动慢。更重要的是抗体分子受电渗作用影响 较大,也就是说点渗作用大于它本身的迁移率。所谓电渗作用是指在电场 中溶液对于一个固定固体的相对移动。琼脂是一种酸性物质,在碱性缓冲 液中进行电泳,它带有负电荷,而与琼脂相接触的水溶液就带正电荷,这 样的液体便向负极移动抗体分子就是随着带正电荷的液体向负极移动的 而一般的蛋白质(如血清抗原)也受电渗作用的影响,使泳动速度减慢, 但它的电泳迁移率远远大于电渗作用。这样抗原体就达到了定向对流,在 两者相遇且比例合适时便形成肉眼可见的沉淀线。9 ③温度对沉淀线的影响：在一定范围内，温度扩散快。通常反应在 0-37℃下进行。在双向扩散时，为了减少沉淀线变形并保持其清晰度，可 在 37℃下形成沉淀线，然后置于室温或冰箱（4℃）中为佳。 ④琼脂浓度对沉淀线形成速度的影响：一般来说，琼脂浓度越大，沉 淀线出现越慢。 ⑤参加扩散的抗原与抗体间的距离对沉淀线形成的影响：抗原、抗体 相距越远，沉淀线形成的越慢，所以在微量玻片法时，孔间距离以 0.25-0.5cm 为好，距离远影响反应速度。当然孔距过远，沉淀线的密度过 大，容易发生融合，有碍对沉淀线数目的确定。 ⑥时间对沉淀线的影响：沉淀线形成一般在 1-3 天出现，14-21 天出现 的数目最多。玻片法可在 1-2 小时出现，一般观察 72 小时，放量过久可出 现沉淀线重合消失。 （三）对流免疫电泳试验 对流免疫电泳是在琼脂扩散基础上结合电泳技术而建立的一种简便而 快速的方法。此方法能在短时间内出现结果，故可用于快速诊断，敏感性 比双向扩散技术高 10-15 倍。 血清蛋白在 PH8.6 条件下带负电荷，所以在电场作用下都向 E 极移动。 但由于抗体分子在这样的 PH 条件下只带微弱的负电荷，而且它的分子量 又较大（为 r 球蛋白）。所以游动慢。更重要的是抗体分子受电渗作用影响 较大，也就是说点渗作用大于它本身的迁移率。所谓电渗作用是指在电场 中溶液对于一个固定固体的相对移动。琼脂是一种酸性物质，在碱性缓冲 液中进行电泳，它带有负电荷，而与琼脂相接触的水溶液就带正电荷，这 样的液体便向负极移动。抗体分子就是随着带正电荷的液体向负极移动的。 而一般的蛋白质（如血清抗原）也受电渗作用的影响，使泳动速度减慢， 但它的电泳迁移率远远大于电渗作用。这样抗原体就达到了定向对流，在 两者相遇且比例合适时便形成肉眼可见的沉淀线