一、原理 该方法巧妙的利用了DNA复制过程和ddNTP的特点。 ◆在模板指导下，DNA聚合酶不断将dNTP加到引物的3'- OH末端使引物延长合成出新的互补的DNA链，如果加 入双脱氧三磷酸核苷(ddNTP),会引起互补链的合成终 止； ◆当使用四组ddNTP进行反应时，由于双脱氧核苷酸在 每个DNA分子中掺入的位置不同，形成一种全部具有 相同5'.引物端和以ddNMP:残基为3'端结尾的一系列长 短不一片段的混合物； ◆采用聚丙烯酰胺凝胶电泳区分长度差一个核苷酸单链 DNA,从而读取DNA核苷酸序列。 12/9212/92 一、原 理 该方法巧妙的利用了DNA复制过程和ddNTP的特点。 ◆在模板指导下，DNA聚合酶不断将dNTP加到引物的3’- OH末端使引物延长合成出新的互补的DNA链，如果加 入双脱氧三磷酸核苷(ddNTP)，会引起互补链的合成终 止； ◆当使用四组ddNTP进行反应时，由于双脱氧核苷酸在 每个DNA分子中掺入的位置不同，形成一种全部具有 相同5’-引物端和以ddNMP残基为3’端结尾的一系列长 短不一片段的混合物； ◆采用聚丙烯酰胺凝胶电泳区分长度差一个核苷酸单链 DNA，从而读取DNA核苷酸序列