生物学 选择性必修3 生物技术与工程 配人教版 课前·基础认知 一、微生物的基本培养技术 分散在固体培养基上，之后经培养得到的单菌落一般是由单 1.培养基的配制。 个微生物繁殖形成的纯培养物。 (1)培养基的概念：人们按照微生物对营养物质的不同 (5)倒平板的流程。 需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质。 拔出锥形瓶的棉塞→将瓶口迅速通过火焰→用拇指和 (2)培养基的作用：用以培养、分离、鉴定、保存微生物或 食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，将培养基(10~ 积累其代谢物。 20mL)倒入培养皿，立即盖上皿盖→等待培养基冷却凝固 (3)培养基的种类：固体培养基（含凝固剂，如琼脂）和液 后，将培养皿倒过来放置。 体培养基。 ·微思考D所有微生物是否都可以用培养基进行培 (4)培养基的营养构成。 养？请说明理由。 ①一般都含有水、碳源、氨源和无机盐等营养物质。 提示否。病毒是没有细胞结构的微生物，必须在活细 ②此外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以 胞内寄生并以复制的方式增殖，因此不能用培养基进行培 及O2的需求。如在培养乳酸杆菌时，需要在培养基中添加 养。目前常用于培养动物病毒的是活鸡胚。 维生素；在培养霉菌时，一般需要将培养基调至酸性；在培养 微判断D 细菌时，需要将培养基调至中性或弱碱性：在培养厌氧微生 1.液体培养基含有水，而固体培养基不含水。() 物时，需要提供无氧的条件。 2.在培养酵母菌过程中，为了防止污染，接种环经火焰 2.无菌技术。 灭菌后应趁热快速蘸取菌液。( (1)目的：获得纯净的微生物培养物。关键是防止杂菌 3.倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅 污染，主要包括消毒和灭菌。 到皿盖上。() (2)消毒。 答案1.×2.×3.× ①概念：是指使用较为温和的物理、化学或生物等方法 微训练连线。 杀死物体表面或内部一部分微生物。 ②方法：常用的消毒方法有煮沸消毒、巴氏消毒等。 方法 对象 (3)灭菌。 ①灼烧灭菌 I.接种针（环） ①概念：是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的 ②干热灭菌 微生物，包括芽孢和孢子。 Ⅱ.培养皿 ②方法：常用的灭菌方法有湿热灭菌、干热灭菌和灼烧 ③化学药物消毒 Ⅲ.牛奶 灭菌等。 (4)消毒和灭菌的主要操作。 ④巴氏消毒 V.水源 ①对操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒。 答案①-I②-Ⅱ③-V④-Ⅲ ②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行 二、微生物的选择培养和计数 灭菌。 1.选择培养基。 (5)做好消毒和灭菌工作后的注意事项。 (1)筛选微生物的原理：人为提供有利于目的菌生长的条 ①避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品接触。 件（包括营养、温度和pH等），同时抑制或阻止其他微生物的 ②接下来的许多操作都应在超净工作台并在酒精灯火 生长。 焰附近进行。 (2)选择培养基。 3.微生物的纯培养。 ①概念：在微生物学中，允许特定种类的微生物生长，同 (1)相关概念。 时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。 ①培养物：在微生物学中，将接种于培养基内，在合适条 ②实例：利用以尿素作为唯一氮源的选择培养基，从土 件下形成的含特定种类微生物的群体称为培养物。 壤中分离出分解尿素的细菌。此细菌能合成脲酶，脲酶催化 ②纯培养物：由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为 尿素分解产生NH,NH,可作为细菌生长的氮源。 纯培养物。 2.微生物的选择培养。 ③纯培养：获得纯培养物的过程称为纯培养。 (1)目的菌：土壤中能分解尿素的细菌。 (2)主要步骤：包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养 (2)方法：稀释涂布平板法。 等步骤。 (3)操作步骤。 (3)菌落：分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内 将10g土样加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，充分 部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞 摇匀 群体。 (4)采用平板划线法和稀释涂布平板法能将单个微生物 取1mL上清液加入盛有9ml无菌水的试管中，依次生物学 选择性必修3 生物技术与工程 配人教版 课前·基础认知 一、微生物的基本培养技术 1.培养基的配制。 (1)培养基的概念:人们按照微生物对营养物质的不同 需求,配制出的供其生长繁殖的营养基质。 (2)培养基的作用:用以培养、分离、鉴定、保存微生物或 积累其代谢物。 (3)培养基的种类:固体培养基(含凝固剂,如琼脂)和液 体培养基。 (4)培养基的营养构成。 ①一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等营养物质。 ②此外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以 及 O2 的需求。如在培养乳酸杆菌时,需要在培养基中添加 维生素;在培养霉菌时,一般需要将培养基调至酸性;在培养 细菌时,需要将培养基调至中性或弱碱性;在培养厌氧微生 物时,需要提供无氧的条件。 2.无菌技术。 (1)目的:获得纯净的微生物培养物。关键是防止杂菌 污染,主要包括消毒和灭菌。 (2)消毒。 ①概念:是指使用较为温和的物理、化学或生物等方法 杀死物体表面或内部一部分微生物。 ②方法:常用的消毒方法有煮沸消毒、巴氏消毒等。 (3)灭菌。 ①概念:是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的 微生物,包括芽孢和孢子。 ②方法:常用的灭菌方法有湿热灭菌、干热灭菌和灼烧 灭菌等。 (4)消毒和灭菌的主要操作。 ①对操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒。 ②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行 灭菌。 (5)做好消毒和灭菌工作后的注意事项。 ①避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品接触。 ②接下来的许多操作都应在超净工作台并在酒精灯火 焰附近进行。 3.微生物的纯培养。 (1)相关概念。 ①培养物:在微生物学中,将接种于培养基内,在合适条 件下形成的含特定种类微生物的群体称为培养物。 ②纯培养物:由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为 纯培养物。 ③纯培养:获得纯培养物的过程称为纯培养。 (2)主要步骤:包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养 等步骤。 (3)菌落:分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内 部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞 群体。 (4)采用平板划线法和稀释涂布平板法能将单个微生物 分散在固体培养基上,之后经培养得到的单菌落一般是由单 个微生物繁殖形成的纯培养物。 (5)倒平板的流程。 拔出锥形瓶的棉塞→将瓶口迅速通过火焰→用拇指和 食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,将培养基(10~ 20mL)倒入培养皿,立即盖上皿盖→等待培养基冷却凝固 后,将培养皿倒过来放置。 微思考 1 所有微生物是否都可以用培养基进行培 养? 请说明理由。 提示 否。病毒是没有细胞结构的微生物,必须在活细 胞内寄生并以复制的方式增殖,因此不能用培养基进行培 养。目前常用于培养动物病毒的是活鸡胚。 微判断 1 1.液体培养基含有水,而固体培养基不含水。( ) 2.在培养酵母菌过程中,为了防止污染,接种环经火焰 灭菌后应趁热快速蘸取菌液。( ) 3.倒平板时,应将打开的皿盖放到一边,以免培养基溅 到皿盖上。( ) 答案 1.× 2.× 3.× 微训练 连线。 答案 ①—Ⅰ ②—Ⅱ ③—Ⅳ ④—Ⅲ 二、微生物的选择培养和计数 1.选择培养基。 (1)筛选微生物的原理:人为提供有利于目的菌生长的条 件(包括营养、温度和pH等),同时抑制或阻止其他微生物的 生长。 (2)选择培养基。 ①概念:在微生物学中,允许特定种类的微生物生长,同 时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。 ②实例:利用以尿素作为唯一氮源的选择培养基,从土 壤中分离出分解尿素的细菌。此细菌能合成脲酶,脲酶催化 尿素分解产生 NH3,NH3 可作为细菌生长的氮源。 2.微生物的选择培养。 (1)目的菌:土壤中能分解尿素的细菌。 (2)方法:稀释涂布平板法。 (3)操作步骤。 将10g土样加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中,充分 摇匀 ↓ 取1mL上清液加入盛有9mL无菌水的试管中,依次 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 􀤂 8