基本内容 辅助手段和时间 分配 测定原理 血清中丙怎酸氨基转移酸能使丙氨酸和α酮戊二酸之间转橡氨基和酮基，生成 丙酮酸及谷氨酸。丙酮酸与2,4二硝基苯肼反应生成2,4 二硝基苯腙，在碱性 20min 液中呈棕红色，测定520nm处吸光度值 赖氏法测定天冬氨酸氨基转移南 操作： 结合理论课知识讲解 1ALT的测定 实验原理。 加入物(mL) 测定管 对照管 血清 基质液 0.25 0.25 混匀后，37°C,30min 2.4-DNPH 0.2 0.25 血清 0.05 混匀，37°C,20min 0.4mmol/LNaOH 25 2.5 实验分组，按照试剂 混匀，室温放置5min,505nm,蒸馏水调零，测定各管吸光度，测定管吸光盒利用赖氏法测定 度减去对照管吸光度，所得差值，查标准曲线，求得相应的ALT活力单位。 2ALT标准曲线的制作 ALT 2 .1molL磷酸盐缓冲液 0.1 01 0.1 01 2umol/mL丙酮酸标准液 0 0.05 0.1 0.15 0 0.25 基质缓冲液 05 0.45 0.4 035 0.25 2.4-DNPH 0.5 0.5 05 0.5 0.5 0.5 混匀， 37C 20min .4mmol/LNaOH 示范利用Excel软件 相当于卡门单位 28 150 200 室温，10min505nm蒸倍水调零，测定各管吸光度，各管吸光度减去零号管吸 制作ALT标准曲线。 光度，所得差值为纵坐标，相应卡门单位为横坐标作图(EXCEL)。 注意事项： 120 min 方法学评价： 指导学生操作 实验操作 问题讨论、答疑 20min