工具酶 功 能 限制性核酸内切酶 识别特异序列，切割DNA DNA连接酶 催化DNA中相邻的5'磷酸基和3'羟基末端之间形成磷酸二 酯键，使DNA切口封合或使两个DNA分子或片段连接 DNA聚合酶I ①合成双链cDNA分子或片段连接 ②缺口平移制作高比活探针 ③DNA序列分析 ④填补3末端 Klenow)片段 具有完整DNA聚合酶的5'→3'聚合、3'-→5'外切活性，而无 5'→3'外切活性。常用于cDNA第二链合成，双链DNA3'末 端标记等 反转录酶 ①合成cDNA ②替代DNA聚合酶I进行填补，标记或DNA序列分析 多聚核苷酸激酶 催化多聚核苷酸5'羟基末端磷酸化 末端转移酶 在3'羟基末端进行同质多聚物加尾 碱性磷酸酶 切除末端磷酸基 工 具 酶 功 能 限制性核酸内切酶 识别特异序列，切割DNA DNA连接酶 催化DNA中相邻的5´磷酸基和3´羟基末端之间形成磷酸二 酯键，使DNA切口封合或使两个DNA分子或片段连接 DNA聚合酶Ⅰ ①合成双链cDNA分子或片段连接 ②缺口平移制作高比活探针 ③DNA序列分析 ④填补3´末端 Klenow片段 具有完整DNA聚合酶I的53聚合、35外切活性，而无 53外切活性。常用于cDNA第二链合成，双链DNA 3末 端标记等 反转录酶 ①合成cDNA ②替代DNA聚合酶I进行填补，标记或DNA序列分析 多聚核苷酸激酶 催化多聚核苷酸5´羟基末端磷酸化 末端转移酶 在3´羟基末端进行同质多聚物加尾 碱性磷酸酶 切除末端磷酸基