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2.12转基因颠茄能高效吸收和分解污染物 用植物净化被污染的水体和土壤等技术被学者们称为“植物修复环境技术”。日本科学工 作者在对大约3000种植物进行调查研究后发现,颠茄这种植物有吸收和分解污染源物质多氯 化联苯的能力。在此基础上他们对该植物进行转基因处理,即把加速根部生长的功能基因导 入颠茄细胞中,培育出了生长速度快、根部发达的重组基因颠茄,从而大大提高了其吸收和 分解污染物质的能力。生产实践表明,严重超标的工厂废水能够被它吸收80%。很多国家积 极引进这一现代生物技术成果,己取得了很好的环保效果。 2.2基因工程技术构建基因工程菌 基因工程技术作为生物降解处理污染物研究的前沿领域,能够提高微生物的降解速率, 拓宽底物的专一性范围,维持低浓度下的代谢活性,改善污染物降解过程中的生物催化稳定 性等。因此,从环境中筛选分离出的菌种,利用基因工程手段,实现质粒转移,分子育种, 基因重组技术能够构建出具有特殊降解功能的超级工程菌。在某些条件下,质粒能赋予宿主 细胞在有相应药物或化学毒物的环境中生存的能力。所以构建基因工程菌的一个重要方面是 质粒育种,构建含多种降解质粒的超级细菌。基因工程菌降解效率高、底物范围广、表达稳 定,比自然环境中的降解性微生物更具竞争力,例如PCP103菌株的构建。基因工程菌的构 建和应用对于美化环境、保护人类健康提供了一系列可行的途径。现代科学工作者把PC技 术用于基因工程菌的构建并已取得了一些成绩,国内外正在进行这方面的研究。 2.2.1降解TCE的基因工程菌 三氯乙烯(TCE)作为氯代溶剂已经广泛应用于金属加工、电子技术、印刷、造纸、涂料 和纺织业。TCE的密度(1.462kgL)比水大,属重质非水溶性液体(DNAPLS),而且水溶性好, 溶解度为1000gL。TCE在环境中易迁移,所以由它引起的土壤和地下水污染是一个长期以 来普遍存在的问题。 目前,物理、化学和生物方法处理技术已被认证可以去除TCE。但物理、化学法去除TCE 不仅费用高,而且不能使它完全降解;常规的生物降解技术虽能弥补这个缺陷,但要求投加共 代谢基质如甲烷、氨、甲酚或甲苯等,而这些物质本身就是环境污染物。而基因工程菌可把 多种降解基因转到同一微生物中,能更有效地降解多种污染物,并且能将其转化为无害物质 或完全降解为CO2和H20。 大量研究表明,利用来自Pseudomonas mendocina KR1菌的甲苯单加氧酶修饰的大肠杆 菌(E.coli)和恶臭假单胞菌(Pseudomonas Putida)可在上述基质不存在时降解TCE。 2.2.2降解PCBs的基因工程菌 多氯联苯(PCBs)是一类由氯置换了联苯中的氢原子的人工合成有机氯化合物。作为稳定 剂,对人的皮肤、肝脏、神经、骨骼等都有不良影响,且是一种致癌因子。1968年日本的米 糠油事件就是由于食用PCBs污染的米糠油引起的。由于PCBs极其稳定,耐酸、耐碱、耐 腐蚀,具有化学稳定性、绝缘性、不燃性、耐热性和高的电解常数等特点,在环境中很难分 解;而且工业用PCBs的混合物如Aroclors有60~80种同系物。因此处理受多氯联苯污染的 环境时要求微生物能降解绝大多数或所有的这些同系物。 PCBs生物降解是由双加氧酶攻击2,3位(或5,6位)碳所引起的,但是不同的微生物 对PCB同系物的降解能力有很大差别.Gibson et al认为这是由于微生物具有单一的非特异性 双加氧酶所致,并提出Pseudomonad的两物种底物专一性的不同是由于BphA上至少两种氨 基酸的不同而引起的。例如:在可降解甲苯的微生物P.put ida F1中插入bphD基因簇可使假单 胞菌以联苯为生长基质,bph和tod的融合可使PCB降解菌Pseudomonas同时具有降解甲苯 和联苯的能力。 除此之外,添加表面活性剂也可促进PCBs的降解。添加表面活性剂一方面可提高疏水 性PCBs的生物可利用性:另一方面可为PCBs降解菌提供碳源。据报道,由于非离子型表面2.1.2 转基因颠茄能高效吸收和分解污染物 用植物净化被污染的水体和土壤等技术被学者们称为“植物修复环境技术”。日本科学工 作者在对大约 3000 种植物进行调查研究后发现,颠茄这种植物有吸收和分解污染源物质多氯 化联苯的能力。在此基础上他们对该植物进行转基因处理,即把加速根部生长的功能基因导 入颠茄细胞中,培育出了生长速度快、根部发达的重组基因颠茄,从而大大提高了其吸收和 分解污染物质的能力。生产实践表明,严重超标的工厂废水能够被它吸收 80%。很多国家积 极引进这一现代生物技术成果,已取得了很好的环保效果。 2.2 基因工程技术构建基因工程菌 基因工程技术作为生物降解处理污染物研究的前沿领域,能够提高微生物的降解速率, 拓宽底物的专一性范围,维持低浓度下的代谢活性,改善污染物降解过程中的生物催化稳定 性等。因此,从环境中筛选分离出的菌种,利用基因工程手段,实现质粒转移,分子育种, 基因重组技术能够构建出具有特殊降解功能的超级工程菌。在某些条件下,质粒能赋予宿主 细胞在有相应药物或化学毒物的环境中生存的能力。所以构建基因工程菌的一个重要方面是 质粒育种,构建含多种降解质粒的超级细菌。基因工程菌降解效率高、底物范围广、表达稳 定,比自然环境中的降解性微生物更具竞争力,例如 PCP103 菌株的构建。基因工程菌的构 建和应用对于美化环境、保护人类健康提供了一系列可行的途径。现代科学工作者把 PCR 技 术用于基因工程菌的构建并已取得了一些成绩,国内外正在进行这方面的研究。 2.2.1 降解 TCE 的基因工程菌 三氯乙烯(TCE) 作为氯代溶剂已经广泛应用于金属加工、电子技术、印刷、造纸、涂料 和纺织业。TCE 的密度(1.462kg/ L) 比水大,属重质非水溶性液体(DNAPLs) ,而且水溶性好, 溶解度为 1000mg/L。TCE 在环境中易迁移,所以由它引起的土壤和地下水污染是一个长期以 来普遍存在的问题。 目前,物理、化学和生物方法处理技术已被认证可以去除 TCE。但物理、化学法去除 TCE 不仅费用高,而且不能使它完全降解; 常规的生物降解技术虽能弥补这个缺陷,但要求投加共 代谢基质如甲烷、氨、甲酚或甲苯等,而这些物质本身就是环境污染物。而基因工程菌可把 多种降解基因转到同一微生物中,能更有效地降解多种污染物,并且能将其转化为无害物质 或完全降解为 CO2 和 H2O。 大量研究表明,利用来自 Pseudomonas mendocina KR1 菌的甲苯单加氧酶修饰的大肠杆 菌( E. coli) 和恶臭假单胞菌( Pseudomonas Putida) 可在上述基质不存在时降解 TCE。 2.2.2 降解 PCBs 的基因工程菌 多氯联苯( PCBs) 是一类由氯置换了联苯中的氢原子的人工合成有机氯化合物。作为稳定 剂,对人的皮肤、肝脏、神经、骨骼等都有不良影响,且是一种致癌因子。1968 年日本的米 糠油事件就是由于食用 PCBs 污染的米糠油引起的。由于 PCBs 极其稳定,耐酸、耐碱、耐 腐蚀,具有化学稳定性、绝缘性、不燃性、耐热性和高的电解常数等特点,在环境中很难分 解; 而且工业用 PCBs 的混合物如 Aroclors 有 60~ 80 种同系物。因此处理受多氯联苯污染的 环境时要求微生物能降解绝大多数或所有的这些同系物。 PCBs 生物降解是由双加氧酶攻击 2,3 位( 或 5,6 位) 碳所引起的,但是不同的微生物 对 PCB 同系物的降解能力有很大差别。Gibson et al 认为这是由于微生物具有单一的非特异性 双加氧酶所致,并提出 Pseudomonad 的两物种底物专一性的不同是由于 BphA 上至少两种氨 基酸的不同而引起的。例如:在可降解甲苯的微生物 P.put ida F1 中插入 bphD 基因簇可使假单 胞菌以联苯为生长基质,bph 和 tod 的融合可使 PCB 降解菌 Pseudomonas 同时具有降解甲苯 和联苯的能力。 除此之外,添加表面活性剂也可促进 PCBs 的降解。添加表面活性剂一方面可提高疏水 性 PCBs 的生物可利用性; 另一方面可为 PCBs 降解菌提供碳源。据报道,由于非离子型表面
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