《生物技术制药》实验指导 感受态是受体菌能接受外源DNA能力的一种生理状态。用CaCI2处理细菌，改 变细胞膜的结构，使质粒DNA能够穿过细菌细胞膜进入细胞。然后在选择性培养基 中培养转化处理过的细菌，转化成功的细菌可以在选择性培养基上生长形成菌落。 本实验采用质粒pUC118转化大肠杆菌DH-5,通过氨苄青霉素抗性筛选转化 :118/pUC119 cloning site pUC118/pUC119 (3,162bp) S-GAATTCGAGCTCGGTACCCOGOGATCCTCTAGAGTCOACCTGCAGGCATGCAAGCTTGGC-3 1Ss683B71 -GCCAAGCTTOCATOCCTOCAOOTCOACTCTAOANGATCCCCOOOTACCOAOCTCOMAT SeeB387 1 S 子。 图1-1质粒pUC118/pUC119图谱 【实验材料和试剂】 (一)实验材料 大肠杆菌DH-5、质粒pUC118(ampicillin,AmpR) (二)培养基和试剂 1.LB液体培养基(%) 胰蛋白胨(Tryptone) 0.5 酵母浸出粉(Yeast extract) 1.0 NaCl 0.5 pH7.2~7.4(用2mol/L NaOH调节)《生物技术制药》实验指导 3 感受态是受体菌能接受外源 DNA 能力的一种生理状态。用 CaCl2 处理细菌，改 变细胞膜的结构，使质粒 DNA 能够穿过细菌细胞膜进入细胞。然后在选择性培养基 中培养转化处理过的细菌，转化成功的细菌可以在选择性培养基上生长形成菌落。 本实验采用质粒 pUC118 转化大肠杆菌 DH- ，通过氨苄青霉素抗性筛选转化 子。 图 1-1 质粒 pUC118/pUC119 图谱 【实验材料和试剂】 （一）实验材料 大肠杆菌 DH- 、质粒 pUC118（ampicillin，AmpR） （二）培养基和试剂 1. LB 液体培养基(%) 胰蛋白胨（Tryptone） 0.5 酵母浸出粉（Yeast extract） 1.0 NaCl 0.5 pH 7.2～7.4（用 2mol/L NaOH 调节）