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1.种子发芽: 小麦种子浸泡2.5小时后,放人25℃恒温箱内或在室温下发芽。 2 酵液提取 取发芽第 或第四天的幼苗15株,放人乳体内,加海砂20毫克,加1%氯化 钠溶液10毫升,用力磨碎。在室温下放置20分钟,搅拌几次。将提取液离心(1500 转/mn)6一7分钟。将上清液倒人量筒,测定酶提取液的总体积。进行酶活力测定时, 将酶提取液稀释10倍 取干燥种子或浸泡2.5小时后的种子15粒作为对照(提取步骤同上)。 3。酶活力测定 (1)取25毫升刻度试管4支。编号。按下表要求加人各试剂(各试剂须25℃预 热10分钟)。 2 3 4 试 剂 玉操种子(感 标准管 空白管 酶提取液 酶液(毫升) 0.5 0.5 标准麦芽糖溶液(毫升 0.5 1%淀粉溶液(毫升) 1 1 1 水(毫升) 一 0.5 将各管混匀,放在25℃,水浴中保温3分钟后,立即向各管中加人10%3,5二硝基水 杨酸溶液2毫升 (2)取出各试管,放人沸水浴中加热5分钟。冷至室温,加水稀释至25毫升。 将各管充分混匀。 试管号 赞费子的四天幼苗的酶 3,标准 4.空白 S0m光吸收值 (3)用空白管作对照:在500毫微米处测定各管的光吸收值,将读数填人上 表。 4.计算 根据溶液的浓度与光吸收值成正比的关系,即:A幕/A来知=C精/C :则C(酶液管浓度)=A×C落/A 式中C代表浓度:A为光吸收值 1.种子发芽: 小麦种子浸泡 2.5 小时后,放人 25℃恒温箱内或在室温下发芽。 2.酶液提取: 取发芽第三天或第四天的幼苗 15 株,放人乳钵内,加海砂 200 毫克,加 1%氯化 钠溶液 10 毫升,用力磨碎。在室温下放置 20 分钟,搅拌几次。将提取液离心(l500 转/min)6-7 分钟。将上清液倒人量筒,测定酶提取液的总体积。进行酶活力测定时, 将酶提取液稀释 10 倍。 取干燥种子或浸泡 2.5 小时后的种子 15 粒作为对照(提取步骤同上)。 3.酶活力测定: (1)取 25 毫升刻度试管 4 支。编号。按下表要求加人各试剂(各试剂须 25℃预 热 10 分钟)。 将各管混匀,放在 25℃,水浴中保温 3 分钟后,立即向各管中加人 10%3,5-二硝基水 杨酸溶液 2 毫升。 (2)取出各试管,放人沸水浴中加热 5 分钟。冷至室温,加水稀释至 25 毫升。 将各管充分混匀。 (3)用空白管作对照;在 500 毫微米处测定各管的光吸收值,将读数填人上 表。 4.计算 根据溶液的浓度与光吸收值成正比的关系,即:A 标准/A 未知=C 标准/C 未知 :则 C(酶液管浓度)=A 酶×C 标准/A 标准 式中 C 代表浓度;A 为光吸收值
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