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3、Spi-重组体的筛选 >野生型噬菌体不能在携带有P2原噬菌体的溶源菌中生长,) 的这种表型称为Spit(对P2的干扰敏感)。 >当基因组中缺少参与重组的red和gam基因时,突变体便可 以在P2溶原菌中生长,其表型称为Spi-。 >基因red和gam位于非必需区域内,外源DNA片段能置换基因 red和gam形成重组体,其重组体能在recA+的P2溶原菌中繁殖, 并且显示出Spi-的表型。 >因此只要选用ecA+的P2溶原菌作为宿主菌,就可以对重组体 进行筛选。 能浸染宿主菌产生噬菌斑的即是重组分子。但这种噬菌斑小且 少。 11 11 ➢野生型λ噬菌体不能在携带有P2原噬菌体的溶源菌中生长,λ 的这种表型称为Spi+(对P2的干扰敏感)。 ➢当λ基因组中缺少参与重组的red和gam基因时,λ突变体便可 以在P2溶原菌中生长,其表型称为Spi-。 ➢基因red和gam位于非必需区域内,外源DNA片段能置换基因 red和gam形成重组体,其重组体能在recA+的P2溶原菌中繁殖, 并且显示出Spi-的表型。 ➢因此只要选用recA+的P2溶原菌作为宿主菌,就可以对重组体 进行筛选。 能浸染宿主菌产生噬菌斑的即是重组分子。但这种噬菌斑小且 少。 3、Spi-重组体的筛选
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