当双链RNA( double- stranded 画双链RNA 进入细胞 RNA, dsRNA)进入细胞,宿 主细胞对这些 dsRNA迅即产 酶切 Dicer) 画且小核酸 生反应,其胞质中的核酸内 切酶 Dicer将 dsRNA切割成多 RNA诱导 个具有特定长度和结构的小 片段RNA(大约21~23bp) 信使RNA (图纸) 即 SIRNA。 SIRNA在细胞内RNA 基因”沉默” 解旋酶的作用下解链成正义 链和反义链,继之由反义 SIRNA再与体内一些酶(包括内切酶、外切酶、解旋酶等)结合形成RNA诱导的沉 默复合物( RNA-induced silencing complex,RlSC)。RSC与外源性基因表达的mRNA 的同源区进行特异性结合,RSC具有核酸酶的功能,在结合部位切割mRNA。被 切割后的断裂mRNA随即降解,从而诱发宿主细胞针对这些mRNA的降解反应。 技术的应用 1RNAi在探索基因功能中的应用 人类基因组计划的完成标志着后基因组时代的来临。阐明人类基因组中功能基因 表达产物的生物学作用对医学发展有着深远意义。传统的基因敲除、转基因或突 变的方法存在受齐唱、不能大规模同步进行等缺点,而RNAi技术可以利用 SIRNA 或 SiRNA表达载体快速、经济、简便的以序列特异方式剔除目的基因表达,所以 现在已经成为探索基因功能的重要硏究手段。同时 SIRNA表达文库构建方法的建 立,使得利用RNAi技术进行高通量筛选成为可能 目前最宏伟的计划是由英国和荷兰科学家联合启动的设计针对人类基因组中每 个基因的 SIRNA项目,然后使用它们靶定肿瘤细胞系中每个基因来确定细胞恶性 转化所需的基因。 2.肿瘤病的治疗 肿瘤是多个基因相互作用的基因网络调控的结果,传统技术诱发的单一癌基因的当双链 RNA（double-stranded RNA，dsRNA）进入细胞，宿 主细胞对这些 dsRNA 迅即产 生反应，其胞质中的核酸内 切酶 Dicer 将 dsRNA 切割成多 个具有特定长度和结构的小 片段 RNA（大约 21～23 bp）， 即siRNA。siRNA在细胞内RNA 解旋酶的作用下解链成正义 链和反义链，继之由反义 siRNA 再与体内一些酶(包括内切酶、外切酶、解旋酶等)结合形成 RNA 诱导的沉 默复合物(RNA-induced silencing complex，RISC)。RISC 与外源性基因表达的 mRNA 的同源区进行特异性结合，RISC 具有核酸酶的功能，在结合部位切割 mRNA。被 切割后的断裂 mRNA 随即降解，从而诱发宿主细胞针对这些 mRNA 的降解反应。 技术的应用 1.RNAi 在探索基因功能中的应用 人类基因组计划的完成标志着后基因组时代的来临。阐明人类基因组中功能基因 表达产物的生物学作用对医学发展有着深远意义。传统的基因敲除、转基因或突 变的方法存在受齐唱、不能大规模同步进行等缺点，而 RNAi 技术可以利用 siRNA 或 siRNA 表达载体快速、经济、简便的以序列特异方式剔除目的基因表达，所以 现在已经成为探索基因功能的重要研究手段。同时 siRNA 表达文库构建方法的建 立，使得利用 RNAi 技术进行高通量筛选成为可能。 目前最宏伟的计划是由英国和荷兰科学家联合启动的设计针对人类基因组中每 个基因的 siRNA 项目，然后使用它们靶定肿瘤细胞系中每个基因来确定细胞恶性 转化所需的基因。 2.肿瘤病的治疗 肿瘤是多个基因相互作用的基因网络调控的结果，传统技术诱发的单一癌基因的