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第二章微生物的形态与分类 “出芽”方式释放,见图2.5.11。在“出芽”过程中,病毒核衣壳从宿主细胞的质膜获得 被膜,相当多的病毒则仍留在细胞内,通过细胞之间接触而传播。有的植物病毒很少释放 到胞外,而是通过胞间连丝或融合细胞在细胞间扩散。不管何种方式释放出来的病毒粒子 均可再实行感染 大肠杆菌T噬菌体繁殖过程的核酸和蛋白质合成的时间进程见图2.5.12。DMA侵入后, 所合成的早期和中期mRNA用于编码核酸酶和DN聚合酶等与DMA复制有关的蛋白质。后期 合成的mRNA用来编码病毒粒子的结构蛋白和T溶菌酶等。 尾部、颈部 核酸酶、DNA聚合酶等 基片和尾丝蛋白 噬菌体头部蛋白 噬菌体DNA □侵染 4溶菌酶产生 早、中期mNA 自我装配 匚早、中期蛋白质 晚期蛋白质 25分钟 图2.5.12大肠杆菌T噬菌体黛殖的时间进程 大肠杆菌T系噬菌体的这种生长(繁殖)方式称为一步生长。它与细胞型生物完全不 同,而且繁殖速度也要快百倍以上。平均每个被侵染的宿主细胞释放出来的新噬菌体粒子 数量可通过一步生长曲线(One- step growth curve)试验来测定,具体方法如下: 将高浓度的敏感宿主菌培养物与适量的噬菌体悬液相混一段时间,以离心法或加入抗 病毒血清除去过量的游离噬菌体,把经过上述处理的菌悬液进行高倍稀释,以免发生第二 次吸附感染,使每个菌体只含一个噬菌体。培养中隔一定时间取样,接种到敏感菌培养物 中培养。通过噬菌斑测定,可获得每个噬菌体感染细菌后释放的新噬菌体粒子数目。以培 养时间为横坐标,以噬菌斑数为纵坐标作图,绘成的曲线就是噬菌体的一步生长曲线,见 图2.5.13 菌内生长曲线 噬菌体数 步生长曲线 港伏 裂解期 平稳期 隐晦期 30 时间(分钟) 图2.5.13T2噬菌体的一步生长曲线 在噬菌体侵染开始的几分钟,没有完整的噬菌体粒子,这段时间称为潜伏期( Latent phase)。潜伏期又分两段:(1)隐晦期( eclipse phase),在潜伏期的前期人为地(如用 氯仿)裂解宿主细胞,裂解液没有侵染性;(2)胞内累积期( intracellular accumulation hase),又称潜伏后期。在隐晦期后,如人为地裂解宿主细胞,其裂解液有侵染性。这是 噬菌体开始装配的时期,在电子显微镜下可观察到初步裝配好的噬菌体粒子第二章 微生物的形态与分类 10/16 “出芽”方式释放,见图 2.5.11。在“出芽”过程中,病毒核衣壳从宿主细胞的质膜获得 被膜,相当多的病毒则仍留在细胞内,通过细胞之间接触而传播。有的植物病毒很少释放 到胞外,而是通过胞间连丝或融合细胞在细胞间扩散。不管何种方式释放出来的病毒粒子 均可再实行感染。 大肠杆菌 T4 噬菌体繁殖过程的核酸和蛋白质合成的时间进程见图 2.5.12。DNA 侵入后, 所合成的早期和中期 mRNA 用于编码核酸酶和 DNA 聚合酶等与 DNA 复制有关的蛋白质。后期 合成的 mRNA 用来编码病毒粒子的结构蛋白和 T4 溶菌酶等。 图 2.5.12 大肠杆菌 T4噬菌体繁殖的时间进程 大肠杆菌 T 系噬菌体的这种生长(繁殖)方式称为一步生长。它与细胞型生物完全不 同,而且繁殖速度也要快百倍以上。平均每个被侵染的宿主细胞释放出来的新噬菌体粒子 数量可通过一步生长曲线(One -step growth curve)试验来测定,具体方法如下: 将高浓度的敏感宿主菌培养物与适量的噬菌体悬液相混一段时间,以离心法或加入抗 病毒血清除去过量的游离噬菌体,把经过上述处理的菌悬液进行高倍稀释,以免发生第二 次吸附感染,使每个菌体只含一个噬菌体。培养中隔一定时间取样,接种到敏感菌培养物 中培养。通过噬菌斑测定,可获得每个噬菌体感染细菌后释放的新噬菌体粒子数目。以培 养时间为横坐标,以噬菌斑数为纵坐标作图,绘成的曲线就是噬菌体的一步生长曲线,见 图 2.5.13。 图 2.5.13 T2 噬菌体的一步生长曲线 在噬菌体侵染开始的几分钟,没有完整的噬菌体粒子,这段时间称为潜伏期(Latent phase)。潜伏期又分两段:(1)隐晦期(eclipse phase),在潜伏期的前期人为地(如用 氯仿)裂解宿主细胞,裂解液没有侵染性;(2)胞内累积期(intracellular accumulation phase),又称潜伏后期。在隐晦期后,如人为地裂解宿主细胞,其裂解液有侵染性。这是 噬菌体开始装配的时期,在电子显微镜下可观察到初步装配好的噬菌体粒子
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