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以用玻棒挑取,放在称量纸上称量。牛肉膏和蛋白胨都容牛肉膏蛋白胨固体培养基配方 易吸潮,称取时动作要迅速,称后要及时盖上瓶盖。 牛肉膏 5.0g 3.溶化将称好的牛肉膏连同称量纸一同放人烧杯, 蛋白陈 10.0g 加入少量的水,加热。当牛肉膏溶化并与称量纸分离后,用 Nacl 5.0g 玻棒取出称量纸。往烧杯中加入称量好的蛋白胨和氯化 琼脂 20.0g 钠,用玻棒搅拌,使其溶解。加入琼脂,加热使其熔化。在 将上述物质溶解后,添加自来水, 定容至1000mL 此过程中,不断用玻棒搅拌,防止琼脂糊底而导致烧杯破 裂。当琼脂完全熔化后,补加自来水至100mL 4.灭菌将配制好的培养基转移到锥形瓶中,加棉 塞,包上牛皮纸,并用皮筋勒紧,再放入高压灭菌锅,在 压力为100kPa、温度为121℃条件下,灭菌15-30min。 将培养皿用几层旧报纸包紧,5~8套培养皿作一包,包好 后放入干热灭菌箱内,在160~170℃下灭菌2h。 5.倒平板待培养基冷却至50℃左右时,在酒精灯 火焰附近倒平板。倒平板的具体操作描述如下。 例平板操作 1.将灭过菌的培养皿放 2.右手拿锥形瓶,使瓶 在火焰旁的桌面上, 口迅速通过火焰。 右手拿装有培养基 的锥形瓶,左手拔 出棉塞 3.用左手的拇指 4.等待平板冷却 和食指将培养皿打 凝固,大约需5 开一条稍大于瓶口 10min。然后,将 的缝隙,右手将锥形 平板倒过来放置, 瓶中的培养基(约10~ 使皿盖在下、皿底在 20mL)倒入培养皿,左手 上 立即盖上培养皿的皿盖。 讨论 1.培养基灭菌后,需要冷却到50℃左右 3.平板冷凝后,为什么要将平板倒置? 时,才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养 4.在倒平板的过程中,如果不小心将培养 基的温度? 基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平板还能 2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰? 用来培养微生物吗?为什么? 课题1微生物的实验室培养17
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