灼烧灭菌将薇生物的接种工具,如接种环、接种针 请你判断以下材料或用具是否需要 消毒或灭菌。如果需要,请选择合 或其他金属用具,直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧,可 适的方法 以迅速彻底地灭菌(图2-2)。此外,接种过程中,试管口 培养细菌用的培养基与培养皿。或瓶口等容易被污染的部位,也可以通过火焰灼烧来灭菌 2.玻棒、试管、烧瓶和吸管。 3.实验操作者的双手。 充分倡 烧层 不充分 凡燃烧层 A 图2-2接种环的灼烧灭菌(1.2、3表示先后顺序) 干热灭菌将灭菌物品放入干热灭菌箱(图2-3)内, 在160~170℃加热1~2h可达到灭菌的目的。能耐高温的、 需要保持干燥的物品,如玻璃器皿(吸管、培养皿)和全 属用具等,可以采用这种方法灭菌。干热灭菌的具体操作 图2-3干热灭菌箱 步骤参见附录4。 高压蒸汽灭菌将灭茵物品放置在盛有适量水的高压 蒸汽灭菌锅(图2-4)内。把锅内的水加热煮沸,将其中原 有的冷空气彻底排除后,将锅密闭,继续加热使锅内的气压 逐步上升,温度也随之升到100℃以上。为达到良好的灭菌 效果,一般在压力为100kPa,温度为121℃的条件下,维持 15~30min。高压蒸汽灭菌的具体操作步驟参见附录4 除了以上方法外,实验室里还用紫外线或化学药物进 行消毒。例如,接种室、接种箱或超净工作台在使用前,可 图2-4高压蒸汽灭菌锅 以用紫外线照射30min,以杀死物体表面或空气中的微生 物。在照射前,适量喷洒石碳酸或煤酚皂溶液等消毒液,可 以加强消毒效果。实验室中常用的其他化学消毒剂,参见 附录5。 实验操作 教学用的大肠杆苗,可以到国家 本实验用牛肉膏蛋白陈固体培养基进行大肠杆菌的纯 指定的菌种保藏中心购买。 化培养,可分成制备培养基和纯化大肠杆菌两个阶段进行。 制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 1.计算根据牛肉膏蛋白胨培养基配方的比例,计算 配制100mL的培养基时,各种成分的用量。 2.称量准确地称取各种成分。牛肉膏比较黏稠,可 16专鹦2微生物的培养与应用