甘肃农业大学《园艺植物组织培养》课程教案 教学 使学生掌握初代培养的基本过程。初代培养物的建立，外植体的取材要求， 无菌外植 目的 体体系的建立，污染的防止。掌握外植体的消毒灭菌措施。重点掌握初代培养时外植体的 与要 褐化问题及其解决措施。掌握初代培养的基本要求，学会观察统计初代培养物。 求 教 第一节 初代培养 学 、 初代培养物的建立 内 1. 外植体的选择与确定 容 主要包括品种选择、部位的确定、取材季节的影响、器官的生理状态和发育年龄。 2.实验室和接种工具的准备（实验室消毒、超净台的清理与消毒、使用工具的消毒） 3.材料的灭菌 ①灭菌要求 ②常用的消毒剂 ③灭菌方法：茎尖、茎段及叶片的消毒、果实和种子的消毒、花药的消毒、根及地下部器 官的消毒 二、污染的防止 1)植物材料的选择及防止污染 2)人为污染的防止 三、外植体的褐变 初代培养中最重要的问题为褐变问题，由于造成外植体褐化的原因是多方面的，故应 具体分析，从不同的方面预防解决。 1)褐变的影响因素（基因型、材料的生理状态、培养基成分） 2)褐变的防止（选择适当的外植体及培养条件、抗氧化剂的作用、连续转移） 四、初代培养的基本要求 1)保证无菌 2)条件合适 3)操作技术过关 五、初代培养的观察统计 培养反应的观察与统计 重点、 重点：外植体的消毒灭菌措施。初代培养时外植体的褐化问题及其解决措施 难点 难点：外植体消毒的具体操作及其最佳消毒时间的确定。褐化问题。 分析 教学设计 调控对策