改变免疫应答类型,此类物质称为免疫佐剂( immunoadjuvant),简称( adjuvant)。 佐剂一般分为:1)无机佐剂,如氢氧化铝,明矾等:2)有机佐剂,包括微生物及其代 谢产物,如分枝杆菌(结核杄菌、卡介苗)、短小棒状杆菌、百日咳杆菌、革兰氏阴性杆菌 的内毒素等;3)合成佐剂,包括人工合成的双链多聚核苷酸,如双链多聚肌苷酸、胞苷酸 ( poly I: C)、双链多聚腺苷酸、尿苷酸( poly A: U)等;4)油剂,如弗氏佐剂、花生油乳化 佐剂、矿物油、植物油等。 弗氏佐剂是目前在动物实验中最常用的佐剂,可分为弗氏不完全佐剂( incomplete Freund' s adjuvant,FA)和弗氏完全佐剂( complete Freund's adjuvant,CFA)两种。前者是将 抗原和油剂(石蜡油或花生油)混合,再加入乳化剂(羊毛脂或吐温-80),使成为油包水 乳剂,即为IFA。在IFA中加入死的分枝杆菌(如灭活结核杆菌)就成为CFA。CFA作用 较弱,但易在注射部位形成肉芽肿和持久性溃疡,因而不适于人体使用。 佐剂的生物学作用为:1)增强免疫原性,使无或微弱免疫原性的物质变成有效的免疫 原;2)可提高初次应答和再次应答的抗体滴度;3)改变抗体类型,使由产生IgM转变为 产生lgG:4)引起或增强迟发型超敏反应。 动物个体的不同组织部位对抗原刺激的敏感性也是不同的。淋巴结、脾脏、足掌、眼睫 膜等是反应的敏感部位,也是免疫动物的常用部位 异体蛋白在佐剂参与下,可诱发机体产生免疫应答,获得相应的抗体。如果抗原的免疫 原性很强,在基础免疫(第一次免疫)之后,加强免疫3~4次,便可获得较高效价的抗血 清( antiserum) 8.6双向免疫扩散及免疫电泳 将可溶性抗原(如小牛血清)与相应抗体(如兔抗小牛血清的抗体)混合,当两者比例 合适并有电解质(如氯化钠、磷酸盐等)存在时,即有抗原一抗体复合物的沉淀出现,此为 沉淀反应( precipitin reaction)。如以琼脂凝胶为支持介质,则在凝胶中出现可见的沉淀线 沉淀弧或沉淀峰。根据沉淀出现与否及沉淀量的多寡,可定性、定量地检测出样品中抗原或 抗体的存在及含量。免疫学的一些测定方法即基于此特性。 双向扩散法( double diffusion),最早由 Ouchterlony创立,故又称 Ouchterlony法。此法 是利用琼脂凝胶为介质的一种沉淀反应。琼脂凝胶是多孔的网状结构,大分子物质可以自由 通过,这种分子的扩散作用使分别两处的抗原和相应抗体相遇,形成抗原一抗体复合物,比 例合适时出现沉淀。由于凝胶透明度高,可直接观察到复合物的沉淀线(弧)。沉淀线(弧) 的特征与位置取决于抗原相对分子质量的大小、分子结构、扩散系数和浓度等因素。当抗原、161 改变免疫应答类型，此类物质称为免疫佐剂（immunoadjuvant），简称（adjuvant）。 佐剂一般分为：1）无机佐剂，如氢氧化铝，明矾等；2）有机佐剂，包括微生物及其代 谢产物，如分枝杆菌（结核杆菌、卡介苗）、短小棒状杆菌、百日咳杆菌、革兰氏阴性杆菌 的内毒素等；3）合成佐剂，包括人工合成的双链多聚核苷酸，如双链多聚肌苷酸、胞苷酸 （poly I:C）、双链多聚腺苷酸、尿苷酸（poly A:U）等；4）油剂，如弗氏佐剂、花生油乳化 佐剂、矿物油、植物油等。 弗氏佐剂是目前在动物实验中最常用的佐剂，可分为弗氏不完全佐剂（incomplete Freund’s adjuvant, IFA）和弗氏完全佐剂（complete Freund’s adjuvant, CFA）两种。前者是将 抗原和油剂（石蜡油或花生油）混合，再加入乳化剂（羊毛脂或吐温－80），使成为油包水 乳剂，即为 IFA。 在 IFA 中加入死的分枝杆菌（如灭活结核杆菌）就成为 CFA。CFA 作用 较弱，但易在注射部位形成肉芽肿和持久性溃疡，因而不适于人体使用。 佐剂的生物学作用为：1）增强免疫原性，使无或微弱免疫原性的物质变成有效的免疫 原；2）可提高初次应答和再次应答的抗体滴度；3）改变抗体类型，使由产生 IgM 转变为 产生 IgG；4）引起或增强迟发型超敏反应。 动物个体的不同组织部位对抗原刺激的敏感性也是不同的。淋巴结、脾脏、足掌、眼睫 膜等是反应的敏感部位，也是免疫动物的常用部位。 异体蛋白在佐剂参与下，可诱发机体产生免疫应答，获得相应的抗体。如果抗原的免疫 原性很强，在基础免疫（第一次免疫）之后，加强免疫 3～4 次，便可获得较高效价的抗血 清（antiserum）。 8.6 双向免疫扩散及免疫电泳 将可溶性抗原（如小牛血清）与相应抗体（如兔抗小牛血清的抗体）混合，当两者比例 合适并有电解质（如氯化钠、磷酸盐等）存在时，即有抗原―抗体复合物的沉淀出现，此为 沉淀反应（precipitin reaction）。如以琼脂凝胶为支持介质，则在凝胶中出现可见的沉淀线、 沉淀弧或沉淀峰。根据沉淀出现与否及沉淀量的多寡，可定性、定量地检测出样品中抗原或 抗体的存在及含量。免疫学的一些测定方法即基于此特性。 双向扩散法（double diffusion），最早由 Ouchterlony 创立，故又称 Ouchterlony 法。此法 是利用琼脂凝胶为介质的一种沉淀反应。琼脂凝胶是多孔的网状结构，大分子物质可以自由 通过，这种分子的扩散作用使分别两处的抗原和相应抗体相遇，形成抗原―抗体复合物，比 例合适时出现沉淀。由于凝胶透明度高，可直接观察到复合物的沉淀线（弧）。沉淀线（弧） 的特征与位置取决于抗原相对分子质量的大小、分子结构、扩散系数和浓度等因素。当抗原