于各试管中加入1m1试剂②，1与3管各加0.5m1正常虫和药剂处理后的虫浆，5号管加入 0.5m1磷酸盐缓冲液，摇匀后置于预先调好为37度的恒温水浴摇床里40分钟。除空白管外 其它各管应立即加 入21试剂③加④混合液（按1：1比例临时混合），用力摇动1分钟以 2对4对照管分别加入正常虫和药剂处理虫的虫浆液各0.5ml。摇匀后加试剂⑤1ml,摇匀 后再加试剂⑥1l,摇匀后用滤纸过滤，空白管的制作同标准曲线中的空白管制作相同。 测定和结果整理 把标准或样本按制作步骤完成后，将滤液分别移至各比色杯中 用分光光度计在波长 540微米下进行测定。以空白管调节光密度为“0”，分别测定标准或样本管并读出它们的光 密度数值。 以不同浓度的乙酰胆碱量（微克分子浓度）数值做横坐标，各管测得的光密度做纵坐 标即可绘制成一标准曲线。把测定样本的光密度值可从标准曲线坐标上求出样本的乙融阳 碱量。从而代入公式，求乙酰胆碱酶被抑制百分率(%) 受药后5龄粘虫（头部）乙酰胆碱酯酶被抑制率(%)： 酶被抑制率(%)=【正常虫酶活性（水解ACh量）-受药虫酶活性（水解Ach量）】/正 常虫酶活性（水解ACh量）×100 习作 采用酶化学法应特别注意哪些条件？于各试管中加入 1ml 试剂②，1 与 3 管各加 0.5ml 正常虫和药剂处理后的 虫浆，5 号管加入 0.5ml 磷酸盐缓冲液，摇匀后置于预先调好为 37 度的恒温水浴摇床里 40 分钟。除空白管外， 其它各管应立即加入 2ml 试剂③加④混合液（按 1：1 比例临时混合），用力摇动 1 分钟以上， 2 对 4 对照管分别加入正常虫和药剂处理虫的 虫浆液各 0.5ml。摇匀后加试剂⑤1ml，摇匀 后再加试剂⑥1ml，摇匀后用滤纸过滤，空白管的制作同标准曲线中的空白管制作相同。 测定和结果整理 把标准或样本按制作步骤完成后，将滤液分别移至各比色杯中，用分光光度计在波长 540 微米下进行测定。以空白管调节光密度为“0”，分别测定标准或样本管并读出它们的光 密度数值。 以不同浓度的乙酰胆碱量（微克分子浓度）数值做横坐标，各管测得的光密度做纵坐 标即可绘制成一标准曲线。把测定样本的 光密度值可从标准曲线坐标上求出样本的乙酰胆 碱量。从而代入公式，求乙酰胆碱酶被抑制百分率（％）。 受药后 5 龄粘虫（头部）乙酰胆碱酯酶被抑制率（％）： 酶被抑制率（％）＝【正常虫酶活性（水解 ACh 量）-受药虫酶活性（水解 Ach 量）】/正 常虫酶活性（水解 ACh 量）×100 习作 1.采用酶化学法应特别注意哪些条件？