山国技论文在线 http://www.paper.edu.cn H COOH -CH=CHCOOH 2 NaH/DMF 4d s methyl o methyl 4b 0 ISopropanol 图2.目标化合物合成 采用荧光法检测各目标化合物体外对GSK-3β的抑制活性。由于荧光信号的强度与剩余 ATP的量成正比,与激酶的活性成反比,与化合物抑制酶活性的强度呈正比,因而可通过检 测溶液中剩余ATP的量,从而检测化合物对激酶的活性。测试结果表明其中化合物(4c)体 外对GSK-3β有中等强度的抑制活性,其IC值为47.69±2.38剛M。 采用与虚筛相同的激酶晶体结构,进一步通过分子对接计算,对比考察4c及非ATP竞 争抑制剂TDZD8与GSK-3B激酶的结合模式(图3),以指导新的分子设计。 ALA204 Ys206 A.活性分子4和TDZ8与GSK-3β激酶的结B.活性分子4c与GSK-3β激酶对接活性腔结构。即以4c 合模式。其中绿色棒状小分子是作为ATP竞争性为中心的周围6A范围内的氨基酸残基 抑制剂共结晶的配体BI0:按原子类型显色的 球棍模型分子为本研究中的4c:蓝色棒状小分子 是文献报道的非ATP竞争性抑制剂TDZD8 图3活性分子与GSK-3β激酶的结合模式 Fig. 3. Docking model of inhibitors to GSK-3B3 CHO + COOH COOH py, piperidine heat CH=CHCOOH 2 SH NH2 heat NaH/DMF RX X=Br or Cl 4 X X N H S O X 3 N S O X R 3a 3b 4a 4b 4c 4d 4e 4f X O S O O R methyl isopropanyl X O S S S R benzyl methyl isopropanyl benzyl 图 2. 目标化合物合成 Fig. 2. Synthesis of target compounds 采用荧光法检测各目标化合物体外对 GSK-3β 的抑制活性。由于荧光信号的强度与剩余 ATP 的量成正比，与激酶的活性成反比，与化合物抑制酶活性的强度呈正比，因而可通过检 测溶液中剩余 ATP 的量，从而检测化合物对激酶的活性。测试结果表明其中化合物（4c）体 外对 GSK-3β有中等强度的抑制活性，其 IC50值为 47.69±2.38 µM。 采用与虚筛相同的激酶晶体结构，进一步通过分子对接计算，对比考察 4c 及非 ATP 竞 争抑制剂 TDZD 8 与 GSK-3β激酶的结合模式(图 3)，以指导新的分子设计。 A.活性分子 4c 和 TDZD 8 与 GSK-3β激酶的结 合模式。其中绿色棒状小分子是作为 ATP 竞争性 抑制剂共结晶的配体 BIO14； 按原子类型显色的 球棍模型分子为本研究中的 4c；蓝色棒状小分子 是文献报道的非 ATP 竞争性抑制剂 TDZD 8。 B.活性分子 4c 与 GSK-3β激酶对接活性腔结构。即以 4c 为中心的周围 6Å 范围内的氨基酸残基 图 3 活性分子与 GSK-3β激酶的结合模式 Fig. 3. Docking model of inhibitors to GSK-3β N S N O O TDZD 8 中国科技论文在线 http://www.paper.edu.cn