如海胆卵可以同时授精，最初的3次细胞分裂是同步的，再如大量海参卵受精后，前9 次细胞分裂都是同步化进行的。 3.增殖抑制解除后的同步分裂 如真菌的休眠孢子移入适宜环境后，它们一起发芽，同步分裂。 (二)人工同步化 1.选择同步化 1)有丝分裂选择法：使单层培养的细胞处于对数增殖期，此时分裂活跃，M1高。有丝 分裂细胞变圆隆起，与培养皿的附着性低，此时轻轻振荡，M期细胞脱离器壁，悬浮于培养液 中，收集培养液，再加入新鲜培养液，依法继续收集，则可获得一定数量的中期细胞。其优点 是，操作简单，同步化程度高，细胞不受药物伤害，缺点是获得的细胞数量较少。（分裂细胞 约占1%~2%) 2)细胞沉降分离法：不同时期的细胞体积不同，而细胞在给定离心场中沉降的速度与其 半径的平方成正比，因此可用离心的方法分离。其优点是可用于任何悬浮培养的细胞，缺点是 同步化程度较低。 2.诱导同步化 1)DNA合成阴断法：选用DNA合成的抑制剂，可逆地抑制DNA合成，而不影响其他时 期细胞的运转，最终可将细胞群阻断在S期或GS交界处。5-氟脱氧尿嘧啶、羟基脲、阿糖 胞苷、氨甲蝶呤、高浓度ADR、GDR和TDR,均可抑制DNA合成使细胞同步化。其中高浓 度TDR对S期细胞的毒性较小，因此常用TDR双阻断法诱导细胞同步化： 在细胞处于对数生长期的培养基中加入过量TDR,(Hela,2molL;CHO, 7.5molL)。S期细胞被抑制，其它细胞继续运转，最后停在G1/S交界处。 移去TDR。洗涤细胞并加入新鲜培养液、细胞又开始分裂。当释放时间大于Ts时，所有 细胞均脱离S期，再次加入过量TDR,细胞继续运转至G/S交界处，被过量TDR抑制而停 止。 优点是同步化程度高，适用于任何培养体系。可将几乎所有的细胞同步化。缺点是产生 非均衡生长，个别细胞体积增大。 2)中期阻断法：利用破坏微管的药物将细胞阻断在中期，常用的药物有秋水仙素和秋水 仙酰胺，后者毒性较少。优点是无非均衡生长现象，缺点是可逆性较差。如海胆卵可以同时授精，最初的 3 次细胞分裂是同步的，再如大量海参卵受精后，前 9 次细胞分裂都是同步化进行的。 3．增殖抑制解除后的同步分裂 如真菌的休眠孢子移入适宜环境后，它们一起发芽，同步分裂。 （二）人工同步化 1．选择同步化 1）有丝分裂选择法：使单层培养的细胞处于对数增殖期，此时分裂活跃，MI 高。有丝 分裂细胞变圆隆起，与培养皿的附着性低，此时轻轻振荡，M 期细胞脱离器壁，悬浮于培养液 中，收集培养液，再加入新鲜培养液，依法继续收集，则可获得一定数量的中期细胞。其优点 是，操作简单，同步化程度高，细胞不受药物伤害，缺点是获得的细胞数量较少。（分裂细胞 约占 1%～2%） 2）细胞沉降分离法：不同时期的细胞体积不同，而细胞在给定离心场中沉降的速度与其 半径的平方成正比，因此可用离心的方法分离。其优点是可用于任何悬浮培养的细胞，缺点是 同步化程度较低。 2．诱导同步化 1）DNA 合成阴断法：选用 DNA 合成的抑制剂，可逆地抑制 DNA 合成，而不影响其他时 期细胞的运转，最终可将细胞群阻断在 S 期或 G/S 交界处。5-氟脱氧尿嘧啶、羟基脲、阿糖 胞苷、氨甲蝶呤、高浓度 ADR、GDR 和 TDR，均可抑制 DNA 合成使细胞同步化。其中高浓 度 TDR 对 S 期细胞的毒性较小，因此常用 TDR 双阻断法诱导细胞同步化： 在细胞处于对数生长期的培养基中加入过量 TDR，（Hela，2mol/L；CHO， 7.5mol/L）。S 期细胞被抑制，其它细胞继续运转，最后停在 G1/S 交界处。 移去 TDR。洗涤细胞并加入新鲜培养液、细胞又开始分裂。当释放时间大于 TS时，所有 细胞均脱离 S 期，再次加入过量 TDR，细胞继续运转至 G1/S 交界处，被过量 TDR 抑制而停 止。 优点是同步化程度高，适用于任何培养体系。可将几乎所有的细胞同步化。缺点是产生 非均衡生长，个别细胞体积增大。 2）中期阻断法：利用破坏微管的药物将细胞阻断在中期，常用的药物有秋水仙素和秋水 仙酰胺，后者毒性较少。优点是无非均衡生长现象，缺点是可逆性较差