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六.取出滤膜,清洗,染色: )取出滤膜,拧下螺帽,将整个小室倒置,托着上层板的四角, 将小室慢慢地水平放在纸巾上,卸下下层板。 2)清洗,迁移细胞现位于滤膜朝上的一面,此面称为细胞面,另 一面为非细胞面,用镊子夹起滤膜的一角,然后用大塑料夹夹 住滤膜这一端距边缘1mm的宽度,拎起滤膜,迅速用塑料夹夹 住滤膜另一端。在盛有PBS缓冲液的平皿中沾湿非细胞面,注 意细胞面不要接触到PBS。 3)在细胞刮上刮去非细胞面上的细胞,靠近大夹子处的滤膜先接 触细胞刮,在与细胞刮成30度角方向轻轻上拉,该过程重复两 次。 4)固定,小心将滤膜浸入甲醇中,室温3分钟,将滤膜取出,用 塑料夹夹住,自然干燥。 5)染色,将固定后的滤膜在Gimsa染色液中染色30分钟,自来水 冲洗,置于玻片上,显微镜下观察。 6)计数,在高倍镜下,每孔随机选取5个视野,累积细胞数,算 出三个复孔的平均值。作为该稀释度的迁移细胞数。六.取出滤膜,清洗,染色: 1) 取出滤膜,拧下螺帽,将整个小室倒置,托着上层板的四角, 将小室慢慢地水平放在纸巾上,卸下下层板。 2) 清洗,迁移细胞现位于滤膜朝上的一面,此面称为细胞面,另 一面为 非细胞面,用镊子夹起滤膜的一角,然后用大塑料夹夹 住滤膜这一端距边缘1mm的宽度,拎起滤膜,迅速用塑料夹夹 住滤膜另一端。在盛有PBS缓冲液的平皿中沾湿非细胞面,注 意细胞面不要接触到PBS。 3) 在细胞刮上刮去非细胞面上的细胞,靠近大夹子处的滤膜先接 触细胞刮,在与细胞刮成30度角方向轻轻上拉,该过程重复两 次。 4) 固定,小心将滤膜浸入甲醇中,室温3分钟,将滤膜取出,用 塑 料夹夹住,自然干燥。 5) 染色,将固定后的滤膜在Gimsa染色液中染色30分钟,自来水 冲洗,置于玻片上,显微镜下观察。 6) 计数,在高倍镜下,每孔随机选取5个视野,累积细胞数,算 出三个复孔的平均值。作为该稀释度的迁移细胞数
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