碱基间形成氢键,如DNA双链一样, 形成DNA一RNA双链。所以,通过用 适当的方法来测定双链的形成,就可以 检查DNA与RNA间碱基排列的相同 性。此外,也可用某基因DNA来分离 和浓缩相对应的mRNA,或相反地用分 离的mRNA以分离对应的基因DNA 1.3蛋白 质的印迹 分析 (Western otter 用于蛋 白质定性定 量及相互作用研究。 与 Southern或 Northern杂交方 似,但 Western blot采用的是聚丙 胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探 针”是抗体,“显色”用标记的二抗。 经过PAGE分离的蛋白质样品,转移到 固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上 固相载体以非共价键形式吸附蛋白质 且能保持电泳分离的多肽类型及其生 物学活性不变。以固相载体上的蛋白质 或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫 反应,再与酶或同位素标记的第二抗体 起反应,经过底物显色或放射自显影以 检测电泳分离的特异性目的基因表达 的蛋白成分。该技术也广泛应用于检测 蛋白水平的表达 三种印迹技术的比较碱基间形成氢键，如 DNA 双链一样， 形成 DNA－RNA 双链。所以，通过用 适当的方法来测定双链的形成，就可以 检查 DNA 与 RNA 间碱基排列的相同 性。此外，也可用某基因 DNA 来分离 和浓缩相对应的 mRNA，或相反地用分 离的 mRNA 以分离对应的基因 DNA。 1.3 蛋白 质的印迹 分析 (Western blotting) 用于蛋 白质定性定 量及相互作用研究。 与Southern或Northern杂交方法类 似，但 Western Blot 采用的是聚丙烯酰 胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探 针”是抗体，“显色”用标记的二抗。 经过 PAGE 分离的蛋白质样品，转移到 固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）上， 固相载体以非共价键形式吸附蛋白质， 且能保持电泳分离的多肽类型及其生 物学活性不变。以固相载体上的蛋白质 或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫 反应，再与酶或同位素标记的第二抗体 起反应，经过底物显色或放射自显影以 检测电泳分离的特异性目的基因表达 的蛋白成分。该技术也广泛应用于检测 蛋白水平的表达。 三种印迹技术的比较