风泰山医学院 细胞生物学 (1)低速离心分离细胞核 。取肝脏，洗净，煎成小块 b.取洗净的鼠肝1g,放于小烧杯中，剪碎，加蔗糖溶液 匀浆，过滤，制备一张滤液涂片 d.取滤液，1800rm离心10分钟 ©.取上清液，移入高速离心机的离心管中，同时制备一张上清液涂片，留取沉淀物。 ￡.沉淀再加蔗糖溶液，1800rm离心10分钟，弃上清 g。加蔗糖，制成悬液，制备涂片 三张涂片在乙醇中固定5分，染色，水洗，分化，镜下观察 (2) 高速离心分离线粒体 a.将有上清液的离心管，13000m离心10分钟，弃上清， b.沉淀中加蔗糖，制成悬液，13000m离心10分钟，上清液吸入另一离心管中，沉淀加蔗糖制成 悬液 。沉注悬液于上清液各制各一张涂出，染鱼，即察 实验结果与讨论 (1)细胞内的各种结构的比重和大小都不相同，在同一离心场中的沉降速度也不同，用不同的转速可 将细胞内各种碎片和细胞器分级分离出米。 实验四细胞的原代培养 1. 实验目的要求 2.掌握作为培养用器官、组织的取材、处理和接种等方法 3.实验设各、仪器与用品 (1)器材：培养瓶、橡皮塞、培养皿、滴管、眼科剪刀、摄子 (2)试剂 三抗混合液、Hanks液、Eagle(mem)培养液 材 孕1820天的大白园 4.实验方法与步骤 (1)取大白鼠，处死，腹部朝上，四肢钉在软木板上 (2) 消毒后取出胚胎 33 Haks液洗胎胞数次，剪取服干、心、肺或皮肤等组织 (4) 用三抗混合液、Hank 液… agle(mem)培养液各洗一次 剪碎组织 再用培养液洗一 (6) 置培养瓶中，加培养液，37℃培养 5.实验结果与讨论 35天后，镜下观察可见外植块周围长出细胞，细胞多时肉眼可见生长是 实验五细胞的传代培养 1. 实验目的要求 (1)熟悉细胞传代的概念，细胞进行传代的客观指标 (2)学据细胞传代的其木操作 2. 实验设备 议器与用品 器材：血球计数板、培养瓶、橡皮塞、滴管 (2)试剂：0.25%的胰藓、Eagle培养液 (3)材料：细胞株或己培养的细胞