(②)用胶带将制胶板两端封好，插入适当梳子，将溶解的琼脂糖（约0℃）倒入，室温冷却凝 周。 ()充分凝因后撕掉两端的胶布，将凝胶置入电泳植中，加1×TBE电泳缓冲液至液面覆盖凝胶 1-2m,小心垂直向上拔出梳子，以保证点样孔完好。 (④用移液器吸取上次实验抽提的水稻总DN4以样品于点样板小孔中，再加入5川1XTE电 泳缓冲液及11的载样缓冲液，混匀后，小心加入点样孔，蓝色样品混合物将沉入点样孔下部。 同时点10l入DNA indIII酶切，30ng/ul)作为分子量标准。 ⑤)打开电源开关，调节电压至3-5V/cm,可见到溴酚蓝条带由负极向正极移动，约一小时后即 可观察。 (6)将凝胶置于紫外透射检测仪上，戴上防护观察罩，打开紫外灯，可见到橙红色核酸条带。根 据条带粗细和荧光强度，可粗略估计该样品DNA的浓度。同时根据己知分子量的标准DA,通过 线性DN条带的相对位置初步估计样品的分子量。 五、注意事项 ()倒胶时注意胶的温度，最好在55℃左右 (2②)胶一定要凝固好才使用。 (3)拔梳子须垂直向上，避免损坏点样孔。 (4)EB是致癌物质，切勿用手接触，更不要污染环境⑵ 用胶带将制胶板两端封好，插入适当梳子，将溶解的琼脂糖（约 50℃）倒入，室温冷却凝 固。 ⑶ 充分凝固后撕掉两端的胶布，将凝胶置入电泳槽中，加 1×TBE 电泳缓冲液至液面覆盖凝胶 1-2mm，小心垂直向上拔出梳子，以保证点样孔完好。 ⑷ 用移液器吸取上次实验抽提的水稻总 DNA 4μl样品于点样板小孔中，再加入 5μl 1×TBE 电 泳缓冲液及 1μl 的载样缓冲液，混匀后，小心加入点样孔，蓝色样品混合物将沉入点样孔下部。 同时点 10μl λDNA(HindIII 酶切，30ng/ul)作为分子量标准。 ⑸ 打开电源开关，调节电压至 3-5V/cm，可见到溴酚蓝条带由负极向正极移动，约一小时后即 可观察。 ⑹ 将凝胶置于紫外透射检测仪上，戴上防护观察罩，打开紫外灯，可见到橙红色核酸条带。根 据条带粗细和荧光强度，可粗略估计该样品 DNA 的浓度。同时根据已知分子量的标准 DNA，通过 线性 DNA 条带的相对位置初步估计样品的分子量。 五、注意事项 ⑴ 倒胶时注意胶的温度，最好在 55℃左右。 ⑵ 胶一定要凝固好才使用。 ⑶ 拔梳子须垂直向上，避免损坏点样孔。 ⑷ EB 是致癌物质，切勿用手接触，更不要污染环境。 2