自然科学进展—国家重点实验室通讯 第5卷 表2本项目育出的柑桔体细胞杂种 作者及年份 1.‘伏令夏橙+‘宁波金柑 邓秀新等 Citrus sinensis+ Fortunella crassi 令夏'橙+宜昌 3.·哈姆林’甜橙+粗柠檬 邓秀新等, 朋娜'脐橙+·红桔 叶新荣等,19 5.·锦橙'+·红桔 邓秀新等,1993 C. sinensis+C, reticulata 6·红桔’+柠槨 甘等 1993 C. reticulata +C. limon 7.柠槺+枳橙 甘霖等,19 C. limon+(C. sinensis x Poncirus trifoliata) 为叶肉原生质体亲本,还是作为胚性愈伤组织(悬浮系)原生质体杀本,衎檬、甜橙以及桔 橙杂种为亲本的组合再生较容易一些.这些稗(种}从一些遗传研兖结果来看,均是杂种 起源起源上越近的种类,其再主能力越强,而一些古老品种,如红桔则再生困难.这 结果在柑桔的器官培养中同桦也观察到 322再生过程中的染色体变异l 对融合体再生过程中染色体数目的观察发现,一些再生十分困难的组合,如脐橙与红 桔,胚状体中有近20%为非整倍体,还观察到个别融合体细胞分裂不同步现象,再生困难 主要与此有关.柑桔属与亲缘关系较远的近缘植物黄皮( Clausena)融合再生出的植株为三 倍体4,而其亲本均为二倍体.在粗柠檬与甜橙的融合再生植株中观察到叶肉亲本类型,同 工酶检测表明它含有另一亲本的个别带、而染色体数为二倍体2n=2x=1827.这些事实说 明柑桔远缘的属间,甚至个别亲缘关系很近的种间,存在或多或少的不协调,至少植株再生 以前是这样.对已获得的一批体细胞杂种的植株形态、生长情况的连续观察表明,体细胞杂 种性状稳定,均为异源四倍体2n=4x=36,同工酶为双亲酶带的合141.20.26 32.3植株再生过程中的困难 相对未融合的细胞而言,融合体再生较难一些,主要表现在融合后再生的畸形胚状体的 比例较高.这些胚状体无法直接萌发,而必须经过器官发生途径,即先诱导不定芽,然后, 再生根成为完整植株.个别含有野生种的组合,如·伏令夏'橙与宜昌橙种间融合,再生的不 定芽在所试验的条件下均不生根;本研究采用试管微嫁接方法,终于获得该组合的一批体细 胞杂种植株26 33体细胞杂种的竞争优势 在所进行的一些融合组合中,如‘伏令夏'甜橙与·宁波'金柑属间,“哈姆林’甜橙与粗 柠檬种间等,体细胞杂种再生的频率很高,达67%.在一个半选择培养条件下,异源四 倍体体细胞杂种与二倍体相比表现出一定优势.不少组合,再生的第一株植株是体细胞杂 种9.20.2也说明了这一点 201994-2008ChinaAcademicJournalElectronicPublishingHouse.Allrightsreservedhttp://www.cnkinet自然科学进展 — 国 家重点 实脸室 通 讯 第 卷 表 本项 目育出的柑桔体细 胞杂种 组 合 卿叨哟粥 ‘ 伏令夏 ’ 橙 ‘ 宁波金柑 ’ ‘川 印 ‘ 不 泣 ‘ 伏令夏 ’橙 十 宜 昌橙 ”川 招 泣改 曰 站 ‘ 哈姆林 ’甜橙 十 粗柠檬 泣即 妇 厄 ‘ 朋娜 ’脐橙 ‘ 红桔 ’ 坛”印 臼 了 玄山 ‘ 锦橙 ’ 十 ‘ 红桔 ’ 翻 拈 邝亡止印 一 红桔 ’ 柠檬 戒应侧 溯 。 柠檬 积橙 俪朋 月印 阴 八乙 作者及年份 邓秀新等 , 邓秀新 等 , 邓秀新等 , 叶新荣等 , 邓秀新 等 , 霖等 , 霖等 , 为叶 肉原生质体亲本 , 还是 作 为胚性 愈 伤 组 织 悬 浮 系 原 生 质 体 亲 本 , 柠 檬 、 甜 橙 以 及 桔 橙 杂种 为亲本 的组合再生较容易 一些 这 些 种 品 种 从 一 些 遗 传研究 结 果 来 看 , 均 是 杂种 起 源 起源上越 近 的种类 , 其再生能力越强 , 而一些 古 老 品种 , 如红 桔 则 再 生 困难 这 一 结果在柑桔 的器官培 养 中同样也观察到 , 再生过程 中的染色体变异 川 对融合体再 生过程 中染 色体数 目的观 察 发 现 , 一 些 再 生 十 分 困难 的 组 合 , 如 脐橙 与红 桔 胚状体 中有 近 为非 整倍体 , 还观 察到个别融合体细 胞分 裂 不 同步 现 象 , 再 生 困 难 主要 与此有关【川 柑桔属 与亲缘 关 系较远 的近缘植物黄皮 融 合再 生 出的植株 为三 倍体 ’ , 而其亲本均 为二倍体 在粗柠檬 与甜橙 的融合再生 植株 中观 察到 叶 肉亲本类 型 , 同 工 酶检测表 明它含有 另 一 亲本 的个别 带 、 而 染 色 体 数 为二 倍体 二 , 这 些 事 实说 明柑桔 远缘 的属 间 , 甚 至 个别 亲缘关系很近 的种 间 , 存在 或 多或少 的不 协调 , 至 少植株再生 以前是 这样 对已 获得 的一批体细胞 杂种 的植株形 态 、 生 长情况 的连续观 察表明 , 体细胞杂 种性状稳定 , 均 为异 源 四倍体 一 一 , 同工酶 为双亲酶带的合 , , , , 植株再生过程 中的困难 相 对未融合的细胞而 言 , 融 合体再生较难 一些 , 主要 表 现在融合后再 生的畸形胚状体 的 比例较高 这些胚状体无法直接萌发 , 而必须经过器官发生途 径 , 即先诱导不定 芽 , 然后 , 再生根成 为完整植株 ’ 个别含有野生种的组合 , 如 ‘ 伏令夏 ’橙与宜 昌橙种间融合 , 再 生 的不 定芽在所试验 的条件下 均 不 生根 本研究采 用试管微嫁接方法 , 终于 获得该组合的一批 体细 胞杂种植株 , 体细胞杂种 的竞争优势 在所进行 的一些融合组 合 中 , 如 ‘ 伏令夏 ’ 甜橙 与 ‘ 宁 波 ’ 金 柑 属 间 , ‘ 哈 姆 林 ’ 甜橙 与粗 柠檬种 间等 , 体细胞杂种再生 的频率很 高 , 达 【 在 一 个半 选 择培 养 条件 下 , 异 源 四 倍体体细胞杂种 与二倍体相 比表现 出一 定 优 势 不 少 组 合 , 再 生 的第 一 株 植 株 是 体细 胞 杂 种 , , 旬 也说 明了这一点