实验九酶的基本性质 一、目的 酶是生物催化剂，是具有催化功能的蛋白质，生物体内的化学反应基本上都 是在酶催化下进行的。通过本实验了解酶催化的高效性、特异性以及pH、温度、 抑制剂和激活剂对酶活力的影响，对于进一步掌握代谢反应及其调控机理具有十 分重要的意义 二、原理 过氧化氢酶广泛分布于生物体内，能将代谢中产生的有害的H02分解成出O 和O,使H,0,不致在体内大量积多。其催化效率比无机催化剂铁粉高10个数量 级，反应速率可观察O2产生情况 酶与一般催化剂最主要的区别之一是酶具有高度的特异（专 )性，即一种 酶只能对一种或一类化合物起催化作用。例如，淀粉酶和蔗糖酶虽然都催化糖昔 健的水解，但是淀粉酶只对淀粉起作用，蔗糖酶只水解蔗糖。还原糖产物可用本 乃狄试剂鉴定。 通过比较淀粉酶在不同H、不同温度以及有无抑制剂或激活剂时水解淀粉的 差异，说明这些环 境因素与酶活性的关系 三、仪器、试剂和材料 1.仪器 (1)恒温水浴(37℃，70℃)、沸水浴(10℃)、冰浴(0℃) (2)试管18×180共19支 (3)吸管lm1支、2ml3支、5ml5支 (4)量筒100ml1个 (5)白瓷板 (6)胶头滴管3支 2.试剂 Fe粉 (2)2%H02(用时现配) (3)唾液淀粉酶溶液：先用蒸馏水漱口，再含10m左右蒸馏水，轻 轻漱动，数分钟后吐出收集在烧杯中，用数层纱布或棉花过滤，即得清彻 的唾液淀粉酶原液根据酶活高低稀释50~100倍，即为唾液淀粉酶溶液。 (4)蔗糖酶溶液：取1g鲜酵母或干酵母放入研体中，加入少量石英砂 和水研磨，加50ml蒸馏水，静置片刻，过滤即得。 (5)2%燕糖溶液：用分析纯蔗糖新鲜配制。 (6)1%淀粉溶液：1g淀粉和0,3 e NaCI,用5ml蒸馏水悬浮，慢慢 入60ml煮沸的蒸馏水中，煮沸min,冷却至室温，加水到100ml,冰箱贮 (7)0.1%淀粉溶液：0.1g淀粉，以5ml水悬浮，慢慢倒入60ml煮沸的 蒸偏水中，煮沸lmin,冷却至室温，加水到100ml,冰箱贮存。 (8)本乃狄(Benedict)试剂：17.3gCuS0,·5H0,加100ml蒸馏水 加热溶解，冷却：173g柠檬酸钠和100gNaC0,·2H0,以600ml蒸馏实验九 酶的基本性质 一、目的 酶是生物催化剂，是具有催化功能的蛋白质，生物体内的化学反应基本上都 是在酶催化下进行的。通过本实验了解酶催化的高效性、特异性以及 pH、温度、 抑制剂和激活剂对酶活力的影响，对于进一步掌握代谢反应及其调控机理具有十 分重要的意义。 二、原理 过氧化氢酶广泛分布于生物体内，能将代谢中产生的有害的 H2O2 分解成 H2O 和 O2，使 H2O2 不致在体内大量积累。其催化效率比无机催化剂铁粉高 10 个数量 级，反应速率可观察 O2 产生情况。 酶与一般催化剂最主要的区别之一是酶具有高度的特异（专一）性，即一种 酶只能对一种或一类化合物起催化作用。例如，淀粉酶和蔗糖酶虽然都催化糖昔 键的水解，但是淀粉酶只对淀粉起作用，蔗糖酶只水解蔗糖。还原糖产物可用本 乃狄试剂鉴定。 通过比较淀粉酶在不同 pH、不同温度以及有无抑制剂或激活剂时水解淀粉的 差异，说明这些环境因素与酶活性的关系。 三、仪器、试剂和材料 1．仪器 （1）恒温水浴（37℃，70℃）、沸水浴（10℃）、冰浴（0℃） （2）试管 18 ×180 共 19 支 （3）吸管 lm l 支、2ml 3 支、5ml 5 支 （4）量筒 100ml 1 个 （5）白瓷板 （6）胶头滴管 3 支 2．试剂 （1） Fe 粉 （2） 2％H2O2（用时现配） （3） 唾液淀粉酶溶液：先用蒸馏水漱口，再含 10ml 左右蒸馏水，轻 轻漱动，数分钟后吐出收集在烧杯中，用数层纱布或棉花过滤，即得清彻 的唾液淀粉酶原液根据酶活高低稀释 50～100 倍，即为唾液淀粉酶溶液。 （4）蔗糖酶溶液：取 1g 鲜酵母或干酵母放入研钵中，加入少量石英砂 和水研磨，加 50ml 蒸馏水，静置片刻，过滤即得。 （5）2％蔗糖溶液：用分析纯蔗糖新鲜配制。 （6）1％淀粉溶液：1g 淀粉和 0.3g NaCI，用 5ml 蒸馏水悬浮，慢慢倒 入 60ml 煮沸的蒸馏水中，煮沸 lmin，冷却至室温，加水到 100ml，冰箱贮 存。 （7）0.1％淀粉溶液：0.1g 淀粉，以 5ml 水悬浮，慢慢倒入 60ml 煮沸的 蒸馏水中，煮沸 lmin，冷却至室温，加水到 100ml，冰箱贮存。 （8）本乃狄（Benedict）试剂：17.3g CuSO4·5H2O，加 100ml 蒸馏水 加热溶解，冷却；173g 柠檬酸钠和 100g NaCO3·2H2O，以 600ml 蒸馏