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·582· 工程科学学报,第37卷,第5期 H,S0,至pH2.5,使明胶的分解反应被彻底抑制,将中 (r)Cr2质量浓度55gL 和后液倒入预处理好的透析袋中,夹紧封口,置于3L 蒸馏水中进行透析,脱除相对分子质量小于3500的多 肽、寡肽及盐分,用磁力搅拌器轻微搅拌以加快透析速 4 12 16 20 24 率:每3h更换一次新水,共换三次新水.透析结束后, b)C2质量浓度45g·L 将透析保留液(相对分子质量大于3500的多肽)倒入 4-▲▲AA▲▲▲ 中15cm的玻璃表面皿中,置于电热鼓风千燥箱中30℃ 鼓风干燥,使透析保留液蒸发浓缩至余液体积为 0 8 12 16 20 5.0mL,移入PE管中并冻存于低温冰箱内:在测试明 a纯水 胶质量浓度前,先将明胶样品放在室温下解冻 1.2.3明胶质量浓度的测定 以二喹啉甲酸法(简称BCA法)测定明胶蛋白的 121620 74 质量浓度.其测定原理为:第一步,在碱性条件下,蛋 分解时间h 白质分子中的肽键与C2·结合形成配合物,同时将 图1CuS04溶液中C2·质量浓度对明胶质量浓度的影响 Cu2·离子还原成Cu'离子;第二步,Cu离子与二喹啉 Fig.1 Effect of Cu'concentration in the CuSO solution on gelatin 甲酸结合生成水溶性的紫色化合物,紫色的深浅因蛋 concentration 白质质量浓度而异,用紫外可见分光光度计在562nm 波长处测定溶液的吸光度. 本文以未分解前的明胶溶液作为标准,先配制成 含明胶量不同的标准溶液系列,添加等量的BCA显色 试剂与明胶蛋白显色,以空白试剂为参比,测出各标准 溶液的吸光度:以明胶质量浓度为横坐标、吸光度为纵 坐标作标准曲线:同法测定明胶分解实验所得样品的 吸光度值,并与标准溶液的吸光度进行比较,确定出被 测样品中明胶的质量浓度.以此获得不同分解条件下 四 电解液中剩余明胶的质量浓度. -0-HS0,150g…L4 2 结果与讨论 -△·Hs0150gl.,Cm245gL 2.1Cu2+离子对电解液中明胶质量浓度的影响 3 2.1.1水溶液中Cu2+离子的影响 分解时间小h 在Cu2离子的质量浓度分别为0、45和55gL1 图2H2S04和C2质量浓度对明胶质量浓度的影响 的CuS0,溶液中加入4.0gL-明胶,使溶液于60℃水 浴中搅拌24h,明胶质量浓度随时间的变化关系见图1 Fig.2 Effects of the concentrations of H2SO and Cu?on gelatin concentration 所示. 从图1可见,在含有明胶的CS04溶液中,当 本一致,溶液中明胶的质量浓度从0h的4.0gL起 Cu2·离子的质量浓度为0~55g·L时,溶液于60℃保 逐渐降低,经过4h后溶液中剩余明胶的质量浓度为 温24h,其中明胶的质量浓度基本不变.这表明CuS0, 1.5gL,明胶分解率为62.5%.图2的结果再次表 溶液中存在0~55gL1的C2*离子,并不影响明胶的 明,电解液中C+离子基本不影响明胶的稳定性.在 稳定性. 后续的实验研究中,溶液中不再加入CS0,以便缩短 2.1.2硫酸溶液中Cu2·离子的影响 明胶分解样品的透析时间. 分别配制含H2S04150g·L和含H,S0,150g· 2.2硫酸质量浓度和温度对明胶质量浓度的影响 L、Cu2*45gL的两种溶液,使溶液中起始明胶质量 在H,S0,质量浓度为150、165和180gL的溶 浓度均为4.0gL,于60℃水浴中搅拌4h,测得不同 液中,保持明胶起始质量浓度均为4.0g·L,在不同 时刻溶液中剩余明胶的质量浓度,结果见图2 温度条件下轻微搅拌分解4h,剩余明胶的质量浓度与 从图2可见,在60℃温度下,溶液中的硫酸明显 时间的关系见图3所示 促进明胶的分解.150gL1H2S0,的溶液中,不论是 从图3可以看出:电解液温度升高和硫酸质量浓 否含有Cu2·离子,明胶质量浓度随时间的变化规律基 度增大,都加剧了明胶的分解;当硫酸质量浓度相同工程科学学报,第 37 卷,第 5 期 H2 SO4 至 pH 2. 5,使明胶的分解反应被彻底抑制,将中 和后液倒入预处理好的透析袋中,夹紧封口,置于 3 L 蒸馏水中进行透析,脱除相对分子质量小于 3500 的多 肽、寡肽及盐分,用磁力搅拌器轻微搅拌以加快透析速 率; 每 3 h 更换一次新水,共换三次新水. 透析结束后, 将透析保留液( 相对分子质量大于 3500 的多肽) 倒入 15 cm 的玻璃表面皿中,置于电热鼓风干燥箱中30 ℃ 鼓风干 燥,使 透 析 保 留 液 蒸 发 浓 缩 至 余 液 体 积 为 5. 0 mL,移入 PE 管中并冻存于低温冰箱内; 在测试明 胶质量浓度前,先将明胶样品放在室温下解冻. 1. 2. 3 明胶质量浓度的测定 以二喹啉甲酸法( 简称 BCA 法) 测定明胶蛋白的 质量浓度. 其测定原理为: 第一步,在碱性条件下,蛋 白质分子中的肽键与 Cu2 + 结合形成配合物,同时将 Cu2 + 离子还原成 Cu + 离子; 第二步,Cu + 离子与二喹啉 甲酸结合生成水溶性的紫色化合物,紫色的深浅因蛋 白质质量浓度而异,用紫外可见分光光度计在 562 nm 波长处测定溶液的吸光度. 本文以未分解前的明胶溶液作为标准,先配制成 含明胶量不同的标准溶液系列,添加等量的 BCA 显色 试剂与明胶蛋白显色,以空白试剂为参比,测出各标准 溶液的吸光度; 以明胶质量浓度为横坐标、吸光度为纵 坐标作标准曲线; 同法测定明胶分解实验所得样品的 吸光度值,并与标准溶液的吸光度进行比较,确定出被 测样品中明胶的质量浓度. 以此获得不同分解条件下 电解液中剩余明胶的质量浓度. 2 结果与讨论 2. 1 Cu2 + 离子对电解液中明胶质量浓度的影响 2. 1. 1 水溶液中 Cu2 + 离子的影响 在 Cu2 + 离子的质量浓度分别为 0、45 和 55 g·L - 1 的 CuSO4 溶液中加入4. 0 g·L - 1明胶,使溶液于60 ℃水 浴中搅拌 24 h,明胶质量浓度随时间的变化关系见图 1 所示. 从图 1 可 见,在 含 有 明 胶 的 CuSO4 溶 液 中,当 Cu2 + 离子的质量浓度为 0 ~ 55 g·L - 1时,溶液于 60 ℃保 温 24 h,其中明胶的质量浓度基本不变. 这表明 CuSO4 溶液中存在 0 ~ 55 g·L - 1的 Cu2 + 离子,并不影响明胶的 稳定性. 2. 1. 2 硫酸溶液中 Cu2 + 离子的影响 分别配 制 含 H2 SO4 150 g·L - 1 和含 H2 SO4 150 g· L - 1、Cu2 + 45 g·L - 1的两种溶液,使溶液中起始明胶质量 浓度均为 4. 0 g·L - 1,于 60 ℃水浴中搅拌 4 h,测得不同 时刻溶液中剩余明胶的质量浓度,结果见图 2. 从图 2 可见,在 60 ℃ 温度下,溶液中的硫酸明显 促进明胶的分解. 150 g·L - 1 H2 SO4 的溶液中,不论是 否含有 Cu2 + 离子,明胶质量浓度随时间的变化规律基 图 1 CuSO4 溶液中 Cu2 + 质量浓度对明胶质量浓度的影响 Fig. 1 Effect of Cu2 + concentration in the CuSO4 solution on gelatin concentration 图 2 H2 SO4 和 Cu2 + 质量浓度对明胶质量浓度的影响 Fig. 2 Effects of the concentrations of H2 SO4 and Cu2 + on gelatin concentration 本一致,溶液中明胶的质量浓度从 0 h 的 4. 0 g·L - 1起 逐渐降低,经过 4 h 后溶液中剩余明胶的质量浓度为 1. 5 g·L - 1,明胶分解率为 62. 5% . 图 2 的结果再次表 明,电解液中 Cu2 + 离子基本不影响明胶的稳定性. 在 后续的实验研究中,溶液中不再加入 CuSO4,以便缩短 明胶分解样品的透析时间. 2. 2 硫酸质量浓度和温度对明胶质量浓度的影响 在 H2 SO4 质量浓度为 150、165 和 180 g·L - 1 的溶 液中,保持明胶起始质量浓度均为 4. 0 g·L - 1,在不同 温度条件下轻微搅拌分解 4 h,剩余明胶的质量浓度与 时间的关系见图 3 所示. 从图 3 可以看出: 电解液温度升高和硫酸质量浓 度增大,都加剧了明胶的分解; 当硫酸质量浓度相同 · 285 ·
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