的蛋白水解酶分解后就可以使一系列基因得到表达其中包括紫外线损伤的修复基因uA、uB、uvC(分别 编码核酸内切酶的亚基)以及recA和lexA基因本身,还有单链结合蛋白基因sb,与λ噬菌体DNA整合有 关的基因hiA、与诱变作用有关的基因 umuDC,与细胞分裂有关的基因sulA,nv,和lon,以及一些功能 不清楚的基因dnA,B,D,F等 sOS反应广泛存在于原核生物和真核生物,它是生物在极为不利的环璄中求得生存的_种基本功能。 然而癌变有可能也是通过SOS反应造成的,因为能引起SOS反应的作用剂通常都具有致癌作用,如X 射线,紫外线,烷化剂,黄曲霉素等,而某些不能致癌的诱变剂并不引起SOS反应,如5-溴尿嘧啶。目前, 有关致癌物的_些简便检测方法就是根据SOS反应原理而设计的,既测定细菌的SOS反应。 第三节RNA指导的DNA合成(反转录) 反转录( reverse transcription:以RNA为模板,合成DNA。与通常转录过程中遗传信息流从DNA到 RNA的方向相反。 1970年,lemn和 Balt imore分别从致癌RNA病毒(劳氏肉瘤病毒和鼠白血病病毒)中发现发反转录酶。 致癌RNA病毒是大类能引起鸟类、哺乳类等动物白血病、肉瘤以及其它肿瘤的病毒。这类病毒侵染 细胞后并不引起细胞死亡,却可以使细胞发生恶性转化。经过改造后可以作为基因治疗的载体 放线菌素D(抑制以DNA为模板的反应,复制和转录)能抑制致癌RNA病毒的复制,可见致癌RNA 病毒的复制过程必然涉及DNA Bader用嘌呤霉素( puromycin)来抑制静止细胞蛋白质的合成,发现这种细胞仍能感染劳氏肉瘤病毒 (RSV),证实反转录酶是由反转录病毒带入细胞的,而不是感染后在宿主细胞中新合成的。 反转录酶 由一个a亚基和一个β亚基组成,含有Zm2+,具有三种酶活力 (1)RNA指导的DNA聚合酶活力(以RNA为模板,合成一条互补的DNA,形成RNA→DNA杂种 分子)。 (2) RNaseh酶活力,水解RNA_DNA杂种分子中的RNA,可沿3→5和5→3两个方向起外切酶 作用。 (3)DNA指导的DNA聚合酶活力。 模板:RNA或DNA 以自身病毒类型的RNA为模板时,诱酶的反转录活力最大,但是带有适当引物的任何种类的RNA都能 作为合成DNA的模板。 引物:RN或DNA 底物:dNIP 二价阳离子:Mg2或Mn2 真核mRNA3端有poA,加入 oligo dt后,可以作为反转录酶的模板,合成cDNA。１３ 的蛋白水解酶分解后就可以使一系列基因得到表达其中包括紫外线损伤的修复基因uvrA、uvrB、uvrC（分别 编码核酸内切酶的亚基）以及 recA和 lexA 基因本身，还有单链结合蛋白基因 ssb，与λ噬菌体 DNA 整合有 关的基因 himA、与诱变作用有关的基因 umuDC，与细胞分裂有关的基因 sulA，ruv，和 lon，以及一些功能 不清楚的基因 dinA，B，D，F等。 SOS 反应广泛存在于原核生物和真核生物，它是生物在极为不利的环境中求得生存的一种基本功能。 然而癌变有可能也是通过 SOS反应造成的，因为能引起 SOS反应的作用剂通常都具有致癌作用，如 X- 射线，紫外线，烷化剂，黄曲霉素等，而某些不能致癌的诱变剂并不引起SOS反应，如 5-溴尿嘧啶。目前， 有关致癌物的一些简便检测方法就是根据SOS 反应原理而设计的，既测定细菌的SOS反应。 第三节 RNA 指导的 DNA 合成（反转录） 反转录（reverse transcription）：以 RNA 为模板，合成 DNA。与通常转录过程中遗传信息流从 DNA 到 RNA 的方向相反。 1970 年，Temin 和 Baltimore 分别从致癌 RNA 病毒（劳氏肉瘤病毒和鼠白血病病毒）中发现发反转录酶。 致癌 RNA 病毒是一大类能引起鸟类、哺乳类等动物白血病、肉瘤以及其它肿瘤的病毒。这类病毒侵染 细胞后并不引起细胞死亡，却可以使细胞发生恶性转化。经过改造后可以作为基因治疗的载体。 放线菌素 D（抑制以DNA 为模板的反应，复制和转录）能抑制致癌 RNA 病毒的复制，可见致癌 RNA 病毒的复制过程必然涉及DNA。 Bader 用嘌呤霉素（puromycin）来抑制静止细胞蛋白质的合成，发现这种细胞仍能感染劳氏肉瘤病毒 （RSV），证实反转录酶是由反转录病毒带入细胞的，而不是感染后在宿主细胞中新合成的。 一、 反转录酶 由一个α亚基和一个β亚基组成，含有Zn 2+，具有三种酶活力。 （1）RNA指导的 DNA聚合酶活力（以 RNA为模板，合成一条互补的 DNA，形成 RNA—DNA杂种 分子）。 （2）RNase H 酶活力，水解RNA—DNA杂种分子中的 RNA，可沿 3 ’→5 ’和 5 ’→3 ’两个方向起外切酶 作用。 （3）DNA指导的DNA聚合酶活力。 模板：RNA或 DNA 以自身病毒类型的 RNA为模板时，该酶的反转录活力最大，但是带有适当引物的任何种类的RNA都能 作为合成 DNA 的模板。 引物：RNA或 DNA 底物：dNTP 二价阳离子：Mg 2+或Mn2+ 真核 mRNA3 ’端有polyA，加入oligo dT后，可以作为反转录酶的模板，合成cDNA