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國鞋 课程负责人刘海斌 (八)乳酸空白液:取1%氟化钠溶液和10%三氯乙酸溶液按1:3体积比混 合而成。 (九)台式离心机、恒温水浴箱、水浴锅、离心管、721分光光度计、试管、 移液管、滴管、吸血管、一次性采血针、消毒棉球、血乳酸分析仪。 四、实验步骤 (一)制备无蛋白血滤液:取2支离心管,按实验三表7-5操作。 表7-5无蛋白血滤液的制备 离心管 INa游液(ml) 0.48 新鲜手指直(l 0.02 立刻摇匀 10%-氯乙酸(n1) 15 充分混匀,离心5min(3000rain),将上清液倒入另-一离心管中 (二)取3支大试管,标明“空白管”、 “标准管”、“测定管”,按表 76操作。 表7-6血乳酸的测定 空白管 标准管 测定管 乳空白液(ml) 0.50 乳棱标准应用液() 0.50 无蛋白血滤液(m1) 0.50 4CuS0,溶液(滴) 浓价酸《l) 试脊放于冷水中,各加3m1,边加边摇匀 置沸水浴5min,冷水浴冷却至15c以下 对基联苯溶液(滴) 2 2 2 分摆匀。37C水保温15in,每循5in一次试管。然后魂水溶90s, 用冷水冷划至室温。以空白调零,在560波长处比色,读取测定斧及标准光密度00值 (三)用掌式血乳酸分析仪测定血乳酸 对实验结果进行计算,并分析讨论。 血乳酸(mg%)=0D测/0D标×100 血乳酸(mmol/L)=血乳酸(mg%)/9 五、注意事项 (一)浓硫酸对显色影响很大,必须选用纯净浓硫酸。加浓硫酸时,应把试 管放入冷水中,慢慢滴加,要边加边摇匀。浓硫酸有强的氧化性和腐蚀性,使用 时要小心
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