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DNA测序技术( Sanger法测序) 黄铂琛15302010029 DNA诊断技术是应用分子生物学方法检测患者体内遗传物质的结 构或表达水平的变化而做出的或辅助临床诊断的技术。而常用的DNA 诊断基本技术中就包括DNA测序技术。 在分子生物学研究中,DNA的序列分析是进一步研究和改造目的 基因的基础。目前用于测序的技术主要有双脱氧链末端终止法和化学 降解法。两者中,由 Sanger等发明的双脱氧链末端终止法得到了更 泛的应用。 Sanger法测序的原理就是利用一种DNA聚合酶来延伸结合在待 定序列模板上的引物。直到掺入一种链终止核苷酸为止。每一次序列 测定由一套四个单独的反应构成,每个反应含有所有四种脱氧核苷酸 三磷酸,并混入限量的一种不同的双脱氧核苷三磷酸。由于双脱氧核 苷三磷酸缺乏延伸所需要的3-OH基团,使延长的寡聚核苷酸选择性DNA 测序技术(Sanger 法测序) 黄铂琛 15302010029 DNA 诊断技术是应用分子生物学方法检测患者体内遗传物质的结 构或表达水平的变化而做出的或辅助临床诊断的技术。而常用的 DNA 诊断基本技术中就包括 DNA 测序技术。 在分子生物学研究中,DNA 的序列分析是进一步研究和改造目的 基因的基础。目前用于测序的技术主要有双脱氧链末端终止法和化学 降解法。两者中,由 Sanger 等发明的双脱氧链末端终止法得到了更 广泛的应用。 Sanger 法测序的原理就是利用一种 DNA 聚合酶来延伸结合在待 定序列模板上的引物。直到掺入一种链终止核苷酸为止。每一次序列 测定由一套四个单独的反应构成,每个反应含有所有四种脱氧核苷酸 三磷酸,并混入限量的一种不同的双脱氧核苷三磷酸。由于双脱氧核 苷三磷酸缺乏延伸所需要的 3-OH 基团,使延长的寡聚核苷酸选择性
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