限制性核酸内切酶 Ⅱ型限制性核酸内切酶酶解反应的操作 大部分型核酸内切酶需要相似的反应条件: Tris-HCl 50 mM pH 7.5 Macl 10 mM 0-50mM低盐酶 Nacl 0-150mM 100mM中盐酶 DTT 1 mM 150mM高盐酶 Volume 20-100 uLl TT 37C1-1.5hr 1U核酸内切酶的酶活性:在最佳反应条件下反应1小时,完全 水解1μg标准DNA所需的酶量限制性核酸内切酶 II 型限制性核酸内切酶酶解反应的操作 大部分II 型核酸内切酶需要相似的反应条件： Tris-HCl 50 mM pH 7.5 MgCl2 10 mM NaCl 0 - 150 mM DTT 1 mM 0 - 50 mM 低盐酶 100 mM 中盐酶 150 mM 高盐酶 Volume 20 - 100 ml T T 37 ℃ 1 - 1.5 hr 1 U 核酸内切酶的酶活性：在最佳反应条件下反应 1 小时，完全 水解 1 mg 标准DNA所需的酶量