乙、血清总蛋白和葡萄糖测定见习 见习类型 仪器操作 学时 2 计划每组人数 4 现有每组人数 见习目的： 熟悉双缩脲法测定血浆总蛋白和葡萄糖氧化酶法测定血浆葡萄糖的原 理及操作方法。 见习内容： L.葡萄糖氧化酶(glucose oxidase,.GOD)利用氧和水将葡萄糖氧化为葡萄糖酸，并 释放过氧化氢。过氧化酶(perosidase,POD)在色原性氧受体存在时将过氧化物分 解为水和氢，并使色原性氧受体4氨基安替比林和酚去氢缩合为红色醒类化合 物，即Trinder反应。红色醌类化合物的生成量与葡萄糖含量成正比。 2.葡萄糖校准液：5.55mmol/几(100mg/d1)。取空白、标准、测定管三支，酶酚混 合试剂3ml:样品量：20ul:混匀，置37℃水浴中，保温15mim,在波长505nm (副波长660nm)处比色，以空白管调零，读取标准管及测定吸光度。 3.在碱性环境中，二价铜离子与蛋白质中的多肽键反应生成有色的络合物，总蛋 白的含量与颜色的深浅成正比。 4.手工操作法：终点法，60-70gL蛋白标准液。取试管4支，标明测定管(U)、 标准管(S)、标本空白管(B)、试剂空白管(RB)。样品量：37.5ul:双缩脲 试剂量：3ml:混匀，反应时间：30mim:在波长540nm处比色，用蒸馏水调 零，测定各管吸光度 见习要点及注意事项： 1.朗伯-比尔定律(lamber-beer):单色光通过溶液，吸收光能，光强度减弱。吸 光度与液层厚度及溶液浓度的乘积成正比，即：A=Kb*c 2。黄疸血清、严重溶血、葡聚糖、酚酞及溴磺酞钠对本法有明显干扰，故用标本 空白管来消除。9 7、血清总蛋白和葡萄糖测定 见习 见习类型 仪器操作 学 时 2 计划每组人数 4 现有每组人数 见习目的： 熟悉双缩脲法测定血浆总蛋白和葡萄糖氧化酶法测定血浆葡萄糖的原 理及操作方法。 见习内容： 1. 葡萄糖氧化酶(glucose oxidase,GOD)利用氧和水将葡萄糖氧化为葡萄糖酸，并 释放过氧化氢。过氧化酶(perosidase,POD)在色原性氧受体存在时将过氧化物分 解为水和氢，并使色原性氧受体 4-氨基安替比林和酚去氢缩合为红色醌类化合 物，即 Trinder 反应。红色醌类化合物的生成量与葡萄糖含量成正比。 2. 葡萄糖校准液：5.55mmol/L(100mg/dl)。取空白、标准、测定管三支，酶酚混 合试剂 3ml；样品量：20ul；混匀，置 37℃水浴中，保温 15min，在波长 505nm （副波长 660nm）处比色，以空白管调零，读取标准管及测定吸光度。 3. 在碱性环境中，二价铜离子与蛋白质中的多肽键反应生成有色的络合物，总蛋 白的含量与颜色的深浅成正比。 4. 手工操作法：终点法，60~70g/L 蛋白标准液。取试管 4 支，标明测定管（U）、 标准管（S）、标本空白管（B）、试剂空白管（RB）。样品量：37.5ul；双缩脲 试剂量：3ml；混匀，反应时间：30min ；在波长 540nm 处比色，用蒸馏水调 零，测定各管吸光度。 见习要点及注意事项： 1. 朗伯-比尔定律（lamber-beer）：单色光通过溶液，吸收光能，光强度减弱。吸 光度与液层厚度及溶液浓度的乘积成正比，即：A=K*b*c 2. 黄疸血清、严重溶血、葡聚糖、酚酞及溴磺酞钠对本法有明显干扰，故用标本 空白管来消除