限制性核酸内切酶 Ⅱ型限制性核酸内切酶酶解反应的操作 型核酸内切酶的多酶联合酶解: 对盐浓度要求不同的酶,可采取下列方法: 使用较贵的酶的盐浓度,加大便宜酶的用量,同时酶解 ●低盐酶先切,然后补加盐,高盐酶再切 ●一种酶先切,然后更换缓冲液,另一种酶再切 0倍体积的5 M NaAC pH5.4 2.5倍体积的冰冷乙醇 冰浴5分钟、高速冷冻离心10分钟、干燥限制性核酸内切酶 II 型限制性核酸内切酶酶解反应的操作 II 型核酸内切酶的多酶联合酶解： 对盐浓度要求不同的酶，可采取下列方法： 使用较贵的酶的盐浓度，加大便宜酶的用量，同时酶解 低盐酶先切，然后补加盐，高盐酶再切 一种酶先切，然后更换缓冲液，另一种酶再切 0.1倍体积的 5 M NaAc pH 5.4 2.5倍体积的冰冷乙醇 冰浴 5 分钟、高速冷冻离心10分钟、干燥