第一节植物基因转化受体系统 1、植物基因转化受体系统的条件：高效稳定的再生能力、较高的遗传稳定性、具有稳定的 外植体来源、对选择性抗生素敏感、对农杆菌侵染有敏感性： 2、植物基因转化受体系统的类型及其特性：愈伤组织再生系统、直接分化再生系统、原生 质体再生系统、胚状体再生系统、生殖细胞受体系统： 3、植物基因转化受体系统的建立程序：高频再生系统的建立、最佳培养基的确立、抗生素 敏感性试验、农杆菌的敏感性试验及菌种的选择。 第二节农杆菌介导法 1、根癌农杆菌Ti质粒介导的基因转化：根癌农杆菌的生物学特性、常用的农杆菌菌株、 根癌农杆菌Ti质粒介导的基因转化的分子机理、T-DNA转移的影响因素、转化细胞的选择培养： 2、发根农杆菌Ri质粒介导的基因转化。 第三节基因枪法 1、基因枪法的基本原理： 2、基因枪法的分类： 3、基因枪法的步骤。 第四节其它转化方法 1、植物病毒载体介导的基因转化： 2、PEG介导的基因转化： 3、显微注射法： 4、花粉管通道法： 5、超声波法： 6、脂质体介导法。 第七章转基因植物的检测与鉴定 (一)教学目的与要求 掌握PCR检测技术，B-葡萄糖苷酸酶基因、绿色荧光蛋白基因、新霉素磷酸转移酶II基因及其 应用，分子杂交的概念，Southern杂交、Northern杂交和Western杂交的程序，表达蛋白的含量测 定方法。 (二)教学重点与难点分析 重点：PC检测技术，B-葡萄糖苷酸酶基因及应用，绿色荧光蛋白基因及应用，新霉素磷酸转 移酶II基因及应用：分子杂交的概念，Southern杂交、Northern杂交和Western杂交的实验步骤， 表达蛋白的含量测定方法。 难点：PCR引物与反应体系的设计，反向PCR(IPCR),反转录PCR(RT-PCR),核酸杂交的原理、 探针制备，Western杂交的原理与技术，生物芯片技术。 (三)教学内容 第一节PCR检测 1、概述： 2、PCR检测技术：引物设计及合成、模板DNA的制备、反应体系、反应条件、扩增产物的 检测：第一节 植物基因转化受体系统 1、植物基因转化受体系统的条件：高效稳定的再生能力、较高的遗传稳定性、具有稳定的 外植体来源、对选择性抗生素敏感、对农杆菌侵染有敏感性； 2、植物基因转化受体系统的类型及其特性：愈伤组织再生系统、直接分化再生系统、原生 质体再生系统、胚状体再生系统、生殖细胞受体系统； 3、植物基因转化受体系统的建立程序：高频再生系统的建立、最佳培养基的确立、抗生素 敏感性试验、农杆菌的敏感性试验及菌种的选择。 第二节 农杆菌介导法 1、根癌农杆菌 Ti 质粒介导的基因转化：根癌农杆菌的生物学特性、常用的农杆菌菌株、 根癌农杆菌 Ti 质粒介导的基因转化的分子机理、T-DNA 转移的影响因素、转化细胞的选择培养； 2、发根农杆菌 Ri 质粒介导的基因转化。 第三节 基因枪法 1、基因枪法的基本原理； 2、基因枪法的分类； 3、基因枪法的步骤。 第四节 其它转化方法 1、植物病毒载体介导的基因转化； 2、PEG 介导的基因转化； 3、显微注射法； 4、花粉管通道法； 5、超声波法； 6、脂质体介导法。 第七章 转基因植物的检测与鉴定 （一）教学目的与要求 掌握 PCR 检测技术，β-葡萄糖苷酸酶基因、绿色荧光蛋白基因、新霉素磷酸转移酶 II 基因及其 应用，分子杂交的概念，Southern 杂交、Northern 杂交和 Western 杂交的程序，表达蛋白的含量测 定方法。 （二）教学重点与难点分析 重点：PCR 检测技术，β-葡萄糖苷酸酶基因及应用，绿色荧光蛋白基因及应用，新霉素磷酸转 移酶 II 基因及应用；分子杂交的概念，Southern 杂交、Northern 杂交和 Western 杂交的实验步骤， 表达蛋白的含量测定方法。 难点：PCR 引物与反应体系的设计，反向 PCR（IPCR），反转录 PCR（RT-PCR），核酸杂交的原理、 探针制备，Western 杂交的原理与技术，生物芯片技术。 （三）教学内容 第一节 PCR 检测 1、概述； 2、PCR 检测技术：引物设计及合成、模板 DNA 的制备、反应体系、反应条件、扩增产物的 检测；