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3、反向PCR(IPCR): 4、反转录PCR(RT-PCR)。 第二节报告基因的表达检测 1、概述: 2、常用的报告基因:B一葡萄糖苷酸酶基因、绿色荧光蛋白基因、氯霉素乙酰转移酶基因、 冠瘿碱合成酶基因、新霉素磷酸转移酶II基因、荧光素酶基因、草丁膦乙酰转移酶基因。 第三节Southern杂交鉴定 1、Southern杂交概述: 2、Southern杂交的实验步骤:植物基因组DNA的提取、探针的制备、植物DNA的限制性酶 切、酶切DNA的电泳分离、DNA变性、印迹、杂交、杂交信号的检出: 3、PCR-Southern杂交: 4、Southern斑点杂交。 第四节Northern杂交鉴定 I、Northern杂交概述: 2、Northern杂交的程序:植物RNA的提取、探针制备、RNA电泳、转膜、杂交和检测。 第五节外源基因表达蛋白的检测 1、酶联免疫吸附法(enzyme--linked immuno sorbent assay,ELISA): 2、Western杂交: 3、表达蛋白的含量测定。 第六节分子标记及生物芯片技术检测 1、分子标记技术检测: 2、生物芯片技术检测。 第八章转基因生物的安全性评价 (一)教学目的与要求 了解转基因植物食品安全性评价的基本原则,转基因食品安全性评价的主要内容,转基因植物 生态环境的安全性评价基本原则、中国对转基因植物的安全性评价管理办法。 (二)教学重点与难点分析 重点:转基因植物食品安全性评价的基本原则,转基因食品安全性评价的主要内容,转基因植 物生态环境的安全性评价基本原则、中国对转基因植物的安全性评价管理办法。 难点:转基因生物的安全控制措施。 (三)教学内容 第一节生物安全性评价概述 1、转基因生物安全性评价的由来: 2、生物安全性评价: 3、转基因植物的安全性评价: 4、生物安全控制措施。 第二节转基因植物食品的安全性评价 1、转基因植物食品的安全性:3、反向 PCR(IPCR); 4、反转录 PCR(RT-PCR)。 第二节 报告基因的表达检测 1、概述; 2、常用的报告基因:β-葡萄糖苷酸酶基因、绿色荧光蛋白基因、氯霉素乙酰转移酶基因、 冠瘿碱合成酶基因、新霉素磷酸转移酶 II 基因、荧光素酶基因、草丁膦乙酰转移酶基因。 第三节 Southern 杂交鉴定 1、Southern 杂交概述; 2、Southern 杂交的实验步骤:植物基因组 DNA 的提取、探针的制备、植物 DNA 的限制性酶 切、酶切 DNA 的电泳分离、DNA 变性、印迹、杂交、杂交信号的检出; 3、PCR-Southern 杂交; 4、Southern 斑点杂交。 第四节 Northern 杂交鉴定 1、Northern 杂交概述; 2、Northern 杂交的程序:植物 RNA 的提取、探针制备、RNA 电泳、转膜、杂交和检测。 第五节 外源基因表达蛋白的检测 1、酶联免疫吸附法(enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA); 2、Western 杂交; 3、表达蛋白的含量测定。 第六节 分子标记及生物芯片技术检测 1、分子标记技术检测; 2、生物芯片技术检测。 第八章 转基因生物的安全性评价 (一)教学目的与要求 了解转基因植物食品安全性评价的基本原则,转基因食品安全性评价的主要内容,转基因植物 生态环境的安全性评价基本原则、中国对转基因植物的安全性评价管理办法。 (二)教学重点与难点分析 重点:转基因植物食品安全性评价的基本原则,转基因食品安全性评价的主要内容,转基因植 物生态环境的安全性评价基本原则、中国对转基因植物的安全性评价管理办法。 难点:转基因生物的安全控制措施。 (三)教学内容 第一节 生物安全性评价概述 1、转基因生物安全性评价的由来; 2、生物安全性评价; 3、转基因植物的安全性评价; 4、生物安全控制措施。 第二节 转基因植物食品的安全性评价 1、转基因植物食品的安全性;
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