pBR322 (4.36kb) 总DNA 酶切基因组和质粒 Mbol BamHI 脱磷酸化 载体去磷酸化防自连 「4连接酶 载体与DNA连接 重组DNA 电激转化大肠杆菌 抗性筛选获得重组克隆 转化E.co1i 基因组文库 14 BamHI MboI OH P OH HO 脱磷酸化 重组DNA T4 连接酶 转化E.coli 基因组文库 总DNA HindIII BamHI SalI EcoRI PstI ScaI Tc Amp R R pBR322 (4.36 kb) Ori HindIII EcoRI PstI ScaI Amp R Ori SalI 酶切基因组和质粒 载体去磷酸化防自连 载体与DNA连接 电激转化大肠杆菌 抗性筛选获得重组克隆