酶活性中心的各基团在空间构象上的相对位置对酶表现活力是至关重要的,而这个相对位置 是由二、三级结构决定的,若二、三级结构受到破坏,这个相对位置也会发生变化,使酶失活。 有实验表明,只要酶活性中心各基团维持正确的相对位置,即使一级结构有轻微变化,也不 影响酶活性。有人用枯草杆菌蛋白酶( subtilisin)处理RNA酶,使Ala20和Ser21之间的肽键水 枯草杆菌蛋白酶 S蛋白 解,成为N端20肽的S肽和C端104肽的S蛋白,S肽中含有原活性中心的Hs12,S蛋白中 含有原活性中心的Hi19。这两者单独存在时均无活性,当在pH70的介质中S肽和S蛋白1 1混合时,酶活性可以恢复 用8M尿素和过量的巯基乙醇处理 Rnase,可使 Rnase的4个二硫键打开,并破坏氢键,使 RNase成为杂乱无章的变性多肽链,完全失去活性。当用透析法除去巯基乙醇和尿素后,酶会缓 慢地重新折叠成具有催化活性的天然构象,SH基也会受空气中的氧所氧化,恢复正确的二硫键, 从而恢复酶活性。如果保留尿素而除去巯基乙醇,再使巯基氧化,然后除去尿素,则酶活性只有 原天然酶的1%。这是因为有尿素时,酶的变性肽链形成二硫键是随机的,8个巯基形成4个二 硫键共有105种组合方式 C×C4×C 105),其中只有1种是正确的(天然的), 其他104种都是错误的,所以酶活性只能恢复到1%。将这种酶加上微量的巯基乙醇,可使SH 基重新组合而缓慢地(约需10小时)恢复成天然活性的酶蛋白 实验表明,只要氨基酸的一级结构不变,当变性条件除去后,酶蛋白能自动地恢复到其热力 学上最稳定的构象。 4.52酶的四级结构与功能的关系 酶的四级结构是指若干个亚基组成全酶,也叫寡聚酶。亚基之间有疏水力、氢键、盐键等非 共价键结合。组成全酶的亚基有同种亚基,也有异种亚基。具有四级结构的酶受到聚合和解聚对11 酶活性中心的各基团在空间构象上的相对位置对酶表现活力是至关重要的，而这个相对位置 是由二、三级结构决定的，若二、三级结构受到破坏，这个相对位置也会发生变化，使酶失活。 有实验表明，只要酶活性中心各基团维持正确的相对位置，即使一级结构有轻微变化，也不 影响酶活性。有人用枯草杆菌蛋白酶（subtilisin）处理 RNA 酶，使 Ala20 和 Ser21 之间的肽键水 解，成为 N 端 20 肽的 S 肽和 C 端 104 肽的 S 蛋白，S 肽中含有原活性中心的 His12，S 蛋白中 含有原活性中心的 His119。这两者单独存在时均无活性，当在 pH7.0 的介质中 S 肽和 S 蛋白 1： 1 混合时，酶活性可以恢复。 用 8M 尿素和过量的巯基乙醇处理 Rnase，可使 Rnase 的 4 个二硫键打开，并破坏氢键，使 RNase 成为杂乱无章的变性多肽链，完全失去活性。当用透析法除去巯基乙醇和尿素后，酶会缓 慢地重新折叠成具有催化活性的天然构象，SH 基也会受空气中的氧所氧化，恢复正确的二硫键， 从而恢复酶活性。如果保留尿素而除去巯基乙醇，再使巯基氧化，然后除去尿素，则酶活性只有 原天然酶的 1%。这是因为有尿素时，酶的变性肽链形成二硫键是随机的，8 个巯基形成 4 个二 硫键共有 105 种组合方式（ 105 4 2 2 2 4 2 6 2 8 =    P C C C C ），其中只有 1 种是正确的（天然的）， 其他 104 种都是错误的，所以酶活性只能恢复到 1%。将这种酶加上微量的巯基乙醇，可使 SH 基重新组合而缓慢地（约需 10 小时）恢复成天然活性的酶蛋白。 实验表明，只要氨基酸的一级结构不变，当变性条件除去后，酶蛋白能自动地恢复到其热力 学上最稳定的构象。 4.5.2 酶的四级结构与功能的关系 酶的四级结构是指若干个亚基组成全酶，也叫寡聚酶。亚基之间有疏水力、氢键、盐键等非 共价键结合。组成全酶的亚基有同种亚基，也有异种亚基。具有四级结构的酶受到聚合和解聚对