内部组织器官：用70%酒精浸过的纱布覆盖体表或用酒精棉球擦拭，进行体表消毒，无菌 打开病鱼的腹腔，以肝、肠、心脏等脏器为材料，先将拟分离病原的部位表面用T%酒精 棉球擦拭或用经火焰上灼烧后的解剖刀烫烧，以杀死表面的杂菌，随即在烧灼部位刺一小 孔，用灭菌的接种环（待冷2一5秒）伸向烧灼部小洞中，用手指将接种环轻轻旋转两次， 借以达到取足材料的目的。左手持握普通琼脂平板，并靠近火焰，右手持取材后的接种环在 琼脂平板上分区划线接种。划线时接种环面与平板表面成30一40度的角轻轻接触，在平 板表面轻快地移动，接种环不应嵌入培养基内，且不要重复，否则形成菌苔。划线完毕，盖 上皿盖，接种环灭菌后放下，并在平皿底部用记号笔注明接种材料、日期及操作者代号。也 可对实质性脏器用无菌剪刀下一小块，用镊子夹住病料使其剖面接触洁净的玻片，作多个触 片，染色后在显微镜下直接镜检，能快速获得结果。 鳃部：用无菌接种环刮取鳃上的分泌物划平板。 血液及体液：用无菌注射器吸取病鱼血液和体液，滴于平板涂布：或用灭菌后的接种环挑取 血液和体液后于平板上划线，分离细菌。 接种后的平板经30℃左右培养24~72h后，检查菌落生长情况，对菌落检查的主要 内容包括： (1)大小：其大小以m表示，微小菌落：针尖大，直径小于0.5m，如支原体菌落、 猪丹毒杆菌菌落：小菌落：直径在0.5一1mm之间，如嗜血杆菌、布氏杆菌菌落：中 等大小的菌落：直径在1~3m之间，如巴氏杆菌、沙门氏杆菌菌落：大的菌落：直径 大于3mm,如炭疽芽孢杆茵菌落等。 (2)形态：圆形，不规则形（根状、树叶状） (3)边缘：整齐，不整齐（锯齿状、虫蚀状、卷发状） (4)表面：光滑、粘液状、粗糙、荷包蛋状、漩涡状、颗粒状 (5)隆起度：隆起，轻度隆起，中央隆起，平升状、扁平状，脐状（凹陷状） (6)颜色：无色、灰白色、白色、金黄色、红色、粉红色内部组织器官：用 70 ％酒精浸过的纱布覆盖体表或用酒精棉球擦拭，进行体表消毒，无菌 打开病鱼的腹腔，以肝、肠、心脏等脏器为材料， 先将拟分离病原的部位表面用 70% 酒精 棉球擦拭或用 经火焰上灼烧后的解剖刀烫烧，以杀死表面的杂菌，随即在烧灼部位刺一小 孔，用灭菌的接种环（待冷 2 ～ 5 秒）伸向烧灼部小洞中，用手指将接种环轻轻旋转两次， 借以达到取足材料的目的。左手持握普通琼脂平板，并靠近火焰，右手持取材后的接种环在 琼脂平板上分区划线接种。划线时接种环面与平板表面成 30 ～ 40 度的角轻轻接触，在平 板表面轻快地移动，接种环不应嵌入培养基内，且不要重复，否则形成菌苔。划线完毕，盖 上皿盖，接种环灭菌后放下，并在平皿底部用记号笔注明接种材料、日期及操作者代号。也 可对实质性脏器用无菌剪刀下一小块，用镊子夹住病料使其剖面接触洁净的玻片，作多个触 片，染色后在显微镜下直接镜检，能快速获得结果。 鳃部：用无菌接种环刮取鳃上的分泌物划平板。 血液及体液：用无菌注射器吸取病鱼血液和体液，滴于平板涂布；或用灭菌后的接种环挑取 血液和体液后于平板上划线，分离细菌。 接种后的平板经 30 ℃ 左右培养 24 ～ 72h 后， 检查菌落生长情况，对菌落检查的主要 内容包括： （ 1 ）大小：其大小以 mm 表示，微小菌落：针尖大，直径小于 0 . 5mm ，如支原体菌落、 猪丹毒杆菌菌落；小菌落：直径在 0 . 5 ～ 1 mm 之间，如嗜血杆菌、布氏杆菌菌落；中 等大小的菌落：直径在 1 ～ 3 mm 之间，如巴氏杆菌、沙门氏杆菌菌落；大的菌落：直径 大于 3mm ，如炭疽芽孢杆菌菌落等。 （ 2 ）形态：圆形，不规则形（根状、树叶状） （ 3 ）边缘：整齐，不整齐（锯齿状、虫蚀状、卷发状） （ 4 ）表面：光滑、粘液状、粗糙、荷包蛋状、漩涡状、颗粒状 （ 5 ）隆起度：隆起，轻度隆起，中央隆起，平升状、扁平状，脐状（凹陷状） （ 6 ）颜色：无色、灰白色、白色、金黄色、红色、粉红色