2. 共聚焦扫描显微镜的成像原理 采用点光源照射标本，在焦平面上形成一个轮廓分明的小的 光点，该点被照射后发出的荧光被物镜收集，并沿原照射光 路回送到由双向色镜构成的分光器。分光器将荧光直接送到 探测器。光源和探测器前方都各有一个针孔，分别称为照明 针孔和探测针孔。两者的几何尺寸一致，约100-200nm；相 对于焦平面上的光点，两者是共轭的，即光点通过一系列的 透镜，最终可同时聚焦于照明针孔和探测针孔。这样，来自 焦平面的光，可以会聚在探测孔范围之内，而来自焦平面上 方或下方的散射光都被挡在探测孔之外而不能成像。以激光 逐点扫描样品，探测针孔后的光电倍增管也逐点获得对应光 点的共聚焦图像，转为数字信号传输至计算机，最终在屏幕 上聚合成清晰的整个焦平面的共聚焦图像。2. 共聚焦扫描显微镜的成像原理 采用点光源照射标本，在焦平面上形成一个轮廓分明的小的 光点，该点被照射后发出的荧光被物镜收集，并沿原照射光 路回送到由双向色镜构成的分光器。分光器将荧光直接送到 探测器。光源和探测器前方都各有一个针孔，分别称为照明 针孔和探测针孔。两者的几何尺寸一致，约100-200nm；相 对于焦平面上的光点，两者是共轭的，即光点通过一系列的 透镜，最终可同时聚焦于照明针孔和探测针孔。这样，来自 焦平面的光，可以会聚在探测孔范围之内，而来自焦平面上 方或下方的散射光都被挡在探测孔之外而不能成像。以激光 逐点扫描样品，探测针孔后的光电倍增管也逐点获得对应光 点的共聚焦图像，转为数字信号传输至计算机，最终在屏幕 上聚合成清晰的整个焦平面的共聚焦图像