1. 普通荧光显微镜的不足 使用荧光物质标记细胞中的特定成分或结构,不仅图 像与对比度增强,而且由于许多荧光显微镜的光源使用 短波长的紫外光,大大提高了分辩率(δ=0.61 λ/ NA )。 但当所观察的荧光标本稍厚时,普通荧光显微镜不仅接 收焦平面上的光量,而且来自焦平面上方或下方的散射 荧光也被物镜接收,这些来自焦平面以外的荧光使观察 到的图像反差和分辨率大大降低(即焦平面以外的荧光 结构模糊、发虚,原因是大多数生物学标本是层次区别 的重叠结构)。 一、激光扫描共聚焦显微镜的成像基本原理1. 普通荧光显微镜的不足 使用荧光物质标记细胞中的特定成分或结构,不仅图 像与对比度增强,而且由于许多荧光显微镜的光源使用 短波长的紫外光,大大提高了分辩率(δ=0.61 λ/ NA )。 但当所观察的荧光标本稍厚时,普通荧光显微镜不仅接 收焦平面上的光量,而且来自焦平面上方或下方的散射 荧光也被物镜接收,这些来自焦平面以外的荧光使观察 到的图像反差和分辨率大大降低(即焦平面以外的荧光 结构模糊、发虚,原因是大多数生物学标本是层次区别 的重叠结构)。 一、激光扫描共聚焦显微镜的成像基本原理