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(二)按支持物的装置形式不同,可分为: 1.平板式电泳,支持物水平放置,是最常用的电泳方式。 2.垂直板式电泳。 3.连续-流动电泳,首先应用纸电泳,将滤纸垂直竖立,两边各放一电极,缓冲液和 样品自顶端下流,与电泳方向垂直。可分离较大量的蛋白质。以后有用淀粉、纤维素粉或玻 璃粉末代替滤纸,分离效果更好。 (三)按pH的连续性不同,可分为: 1.连续pH电泳:电泳的全部过程中缓冲液p山保持不变。如纸电泳、乙酸纤维膜电 泳。 2.非连续pH电泳:缓冲液和支持物间有不同的pH,如聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳、等 电聚焦电泳、等速电泳等,能使分离物质的区带更加清晰,并可对极微量物质进行分离。 四、电泳技术的应用 电泳技术是目前医学研究的重要手段。它可分离各种有机物(氨基酸多肽、蛋白质、 酶、脂类、核苷、核苷酸、核酸等)和无机盐。并可用于分析某种物质的纯度及分子量的测 定。电泳技术和层析法结合和指纹图可用于蛋白质结构的分析:与免疫原理结合的免疫电泳, 提高了对蛋白质的鉴别能力:与酶学方法结合,发现了同工酶。电泳技术是目前分离物质的 一种很好方法,也是医学科学中的重要研究技术。 §6分光分析原理 一、基本原理 有色溶液对光线有选择性的吸收作用,不同物质由于其分子结构不同,对不同波长光线 的吸收能力也不同,因此,每种物质都具有其特异的吸收光谱。有些无色溶液,虽对可见光 无吸收作用,但所含物质可以吸收特定波长的紫外线或红外线。吸收光谱的测定可以用来鉴 定各种不同的物质(图6)。 分光分析法常用于测定溶液中存在的光吸收物质的浓度,其理论依据是Lambert-Beer 定律。 (一)Lambert定律当一束单色光通过一均匀溶液时,由于溶液吸收一部分光能, 使光的强度减弱,若溶液的浓度(©)不变则液层的厚度(L)愈大,光线强度的减弱也愈显著 若C不变: OD o L(二)按支持物的装置形式不同,可分为: 1.平板式电泳,支持物水平放置,是最常用的电泳方式。 2.垂直板式电泳。 3.连续-流动电泳,首先应用纸电泳,将滤纸垂直竖立,两边各放一电极,缓冲液和 样品自顶端下流,与电泳方向垂直。可分离较大量的蛋白质。以后有用淀粉、纤维素粉或玻 璃粉末代替滤纸,分离效果更好。 (三)按 pH 的连续性不同,可分为: 1.连续 pH 电泳:电泳的全部过程中缓冲液 pH 保持不变。如纸电泳、乙酸纤维膜电 泳。 2.非连续 pH 电泳:缓冲液和支持物间有不同的 pH,如聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳、等 电聚焦电泳、等速电泳等,能使分离物质的区带更加清晰,并可对极微量物质进行分离。 四、电泳技术的应用 电泳技术是目前医学研究的重要手段。它可分离各种有机物(氨基酸多肽、蛋白质、 酶、脂类、核苷、核苷酸、核酸等)和无机盐。并可用于分析某种物质的纯度及分子量的测 定。电泳技术和层析法结合和指纹图可用于蛋白质结构的分析;与免疫原理结合的免疫电泳, 提高了对蛋白质的鉴别能力;与酶学方法结合,发现了同工酶。电泳技术是目前分离物质的 一种很好方法,也是医学科学中的重要研究技术。 §6 分光分析原理 一、基本原理 有色溶液对光线有选择性的吸收作用,不同物质由于其分子结构不同,对不同波长光线 的吸收能力也不同,因此,每种物质都具有其特异的吸收光谱。有些无色溶液,虽对可见光 无吸收作用,但所含物质可以吸收特定波长的紫外线或红外线。吸收光谱的测定可以用来鉴 定各种不同的物质(图 6)。 分光分析法常用于测定溶液中存在的光吸收物质的浓度,其理论依据是 Lambert- Beer 定律。 (一)Lambert 定律 当一束单色光通过一均匀溶液时,由于溶液吸收一部分光能, 使光的强度减弱,若溶液的浓度(C)不变则液层的厚度(L)愈大,光线强度的减弱也愈显著。 若 C 不变: OD ∝ L
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