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实验程序: 一豚鼠嗜中性粒细胞的制备 1)取成年豚鼠1只,腹腔注射含0.17%糖原的生理盐水,13 小时后,用PBS缓冲液冲洗腹腔,收集腹腔液, 1500 rpm/min10min,弃上清。 2)轻轻弹起沉淀,用3-5mlPH7.2的37℃预温的(Tris- NH4CL)红细胞溶解液,充分吹散,作用3-5分钟,立 即加入10-15 ml serum-free RPMI1640,吹打均匀, 1500 rpm/min5min,弃上清,再加入serum-free RPM1640,离洗两次。得到豚鼠嗜中性粒细胞,纯度可 达97%以上。 3)将纯化后的嗜中性粒细胞溶在serum-free RPMI1640中, 细胞计数,调整细胞浓度为5x105ml,备用。实验程序: 一豚鼠嗜中性粒细胞的制备 : 1)取成年豚鼠1只,腹腔注射含0.17%糖原的生理盐水,13 小时后,用PBS缓冲液冲洗腹腔,收集腹腔液, 1500rpm/min 10min,弃上清。 2)轻轻弹起沉淀,用3-5ml PH 7.2的37℃预温的( Tris￾NH4CL) 红细胞溶解液,充分吹散,作用3-5分钟,立 即加入10-15ml serum-free RPMI1640,吹打均匀, 1500rpm/min 5min,弃上清,再加入serum-free RPMI1640,离洗两次。得到豚鼠嗜中性粒细胞,纯度可 达97%以上。 3)将纯化后的嗜中性粒细胞溶在serum-free RPMI 1640中, 细胞计数,调整细胞浓度为5x105 /ml,备用
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