限制图谱(restriction map)。l973年史密斯和内森斯提出修饰-限制酶的命 名法。限制性核酸内切酶可用以在特定位点切割DA,限制酶的发现使分离基因 成为可能。为表彰上述科学家在发现和使用限制酶中的功绩，1978年的诺贝尔 医学奖被授予阿尔伯、内森斯和史密斯。 1973年，科恩(Cohen)和博耶(Boyer)等将psC101质粒作为载体与R质 粒的四环素和卡那霉素的抗性基因相融合，并将重组体DA转化大肠杆菌，首次 实现了DNA的分子克隆。 1975年桑格(Sanger)实验室建立了酶法快速测定DNM序列的技术。1977 年吉尔伯特(Gilbert)实验室又建立了化学测定DA序列的技术。分子克隆和 测序方法的建立，使重组DA技术系统得以产生。1980年诺贝尔化学奖被授予 伯格、吉尔伯特和桑格，以肯定他们在发展DA重组与测序技术中的贡献。 1977年板仓(Itakura)和博耶用人工合成的生长激素释放抑制素 (Somatostatin,ST)基因构建表达载体，并在大肠杆菌细胞内表达成功，得 到第一个基因工程的产品。1982年，在建立转基因植物和转基因动物的技术上 均获得重大突破。借助土壤农杆菌T1质粒可将外源基因导入双子叶植物细胞内 并发生整合，从而使植株获得新的遗传性状。同年通过基因工程方法把大鼠生长 激素基因注射到小鼠受精卵的雌核中，然后移植到母鼠子宫内，由此培有出巨型 小鼠。仅仅10年时间，基因工程在实践中迅速成熟，日趋完普。 二、基因工程的基本操作 ①分离或合成基因： ②通过体外重组将基因插入载体： ③将重组DNM导入细胞： ④扩增克隆的基因： ⑤筛选重组体克降： ⑥对克隆的基因进行鉴定或测序 ⑦控制外源基因的表达： ⑧得到基因产物或转基因动物、转基因植物。上述步骤可用图10-1来表示。 三、基因工程的应用 工业