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(6)取上清加等体积(酚、氯仿、异戊醇之体积比为25:24:1)溶液,抽 提2~4次,界面无白色物质,10000g×5min离心 (7)取上清加2倍体积95%乙醇,室温静置15min,然后12000g×10min 离心 (8)弃上清,沉淀用75%乙醇洗涤1次,以12000g×5min离心。 (9)弃上清,取沉淀,真空干燥后即得线粒体DNA。将其溶于适量的 正缓冲液中,一20℃保存。 5实验结果鉴定 用紫外分光光度仪测定,A260:A280为20左右。若纯度较高,能直接 用限制性内切酶进行酶切图谱分析。 (上海中医药大学王晓玲)8 (6)取上清加等体积(酚、氯仿、异戊醇之体积比为 25:24:1)溶液,抽 提 2~4 次,界面无白色物质,10000g×5min 离心。 (7)取上清加 2 倍体积 95%乙醇,室温静置 15min,然后 12000g×10min 离心。 (8)弃上清,沉淀用 75%乙醇洗涤 1 次,以 12000g×5min 离心。 (9)弃上清,取沉淀,真空干燥后即得线粒体 DNA。将其溶于适量的 TE 缓冲液中,-20℃保存。 5.实验结果鉴定 用紫外分光光度仪测定,A260:A280 为 2.0 左右。若纯度较高,能直接 用限制性内切酶进行酶切图谱分析。 (上海中医药大学 王晓玲)
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